Table 2. Master Mix.

reagents	final concentration	singlet	duplex	triplex
H2O	To 50 μL	+	+	+
Isothermal buffer (NEB)	1×	+	+	+
MgSO4 (NEB)	6 mM	+	+	+
dNTPs (NEB)	1.4 mM	+	+	+
NTPs (NEB)	0.5 mM	+	+	+
HiT7 (NEB)	20 U/μL	+	+	+
Bst DNA polymerase, exonuclease minus (Lucigen)	4.2 U/μL	+	+	+
Inorganic pyrophosphatase (NEB)	0.4 U/μL	+	+	+
primer set 1 (20×)	1×	+	+	+
primer set 2 (20×)	1×	–	+	+
primer set 3 (20×)	1×	–	–	+
FAM RNA reporter (IDT)	1 μM	+	+	+
ROX DNA reporter (IDT)	4 μM	–	+	+
Hex RNA reporter (IDT)	2 μM	–	–	+
TccCas13a RNP	80 nM	+	+	+
AapCas12b RNP	80 nM	–	+	+
HheCas13a RNP	80 nM	–	–	+
target 1	×	+	+	+
target 2	×	–	+	+
target 3	×	–	–	+