胸腺素β4促进创面愈合的研究进展

Abstract

With the aging of population and the development of social economy, the incidence of chronic wounds is increasing day by day, while the incidence of burns and trauma remains at a high level, making wound repair an increasingly concerned area in clinical practice. Thymosin β4 is a naturally occurring small molecule protein in vivo, which is widely distributed in a variety of body fluids and cells, especially in platelets. Thymosin β4 has biological activities of promoting angiogenesis, anti-inflammation, anti-apoptosis, and anti-fibrosis, and has many important functions in wound repair. Thymosin β4 has been observed to promote the healing of various wounds, such as burns, diabetic ulcers, pressure ulcers. This paper will review the molecular structure, mechanism of wound healing promotion, pharmacokinetics, and clinical application of thymosin β4, aiming to introduce its potential in wound treatment and the shortcomings of current researches.

我国分别在1998、2008和2018年针对住院患者慢性创面展开大规模流行病学调查, 结果显示, 我国20年间创面治疗水平显著提高, 住院患者慢性创面发病率已由1998年的1.5%~3.0%下降至2008年的1.7‰和2018年的2.1‰；然而随着人口老龄化和慢性疾病发病率的升高, 慢性创面的主要发病因素已由创伤转变为糖尿病、感染和压疮^[1-3]。慢性创面不但严重影响患者的身心健康, 还给患者家庭和社会造成沉重的经济负担。2018年的全国流行病学调查显示, 我国慢性创面患者单次住院的平均治疗费用高达55 270.25元^[3]。与此同时, 烧创伤的发病率仍处于较高水平。Haagsma等^[4]估计, 2013年全球约有9.73亿人因烧创伤就医, 约480万人因此而死亡, 烧创伤造成的疾病负担约占全部疾病的10.1%。因此, 如何安全、有效、经济地促进创面愈合, 已经成为全球医药卫生领域从业人员共同关注的内容。胸腺素β4是一种体内广泛存在的再生活性因子, 近来已被证实在创面愈合、毛囊再生、心肌损伤修复、神经发育等方面具有促进作用。本文将从胸腺素β4的分子结构及活性位点、促创面愈合作用机制、药代动力学及该因子在创面治疗中的临床应用方面进行综述, 旨在介绍胸腺素β4在创面愈合领域的研究进展和当前研究的不足。

1. 胸腺素β4概述

胸腺素是一类具有激素样作用的水溶性生物活性分子, 在1966年首次被国外学者于小牛胸腺提取物中发现。胸腺素包括一系列氨基酸排序和功能上不同的多肽, 根据等电点不同被分为α、β、γ 3个超家族。其中等电点 < 5者被称为α族胸腺素, 等电点位于5~7之间者被称为β族胸腺素, 等电点 > 7者被称为γ族胸腺素^[5]。β族胸腺素由40~44个氨基酸残基构成, 能与G肌动蛋白特异性结合从而促进细胞迁移, 因此备受研究者关注。目前, 人体内发现的β族胸腺素共有3种, 即胸腺素β4、胸腺素β10和胸腺素β15, 三者具有显著的氨基酸序列同源性。其中胸腺素β4是在1981年经联合柱色谱法和凝胶过滤法从牛胸腺提取物中分离出来的短肽, 仅由44个氨基酸构成, 是β族胸腺素中数量最多的成员, 占β族胸腺素总量的70%~80%。胸腺素β4分子结构高度保守, 由X染色体上的TMSB4X基因编码, 该分子普遍存在于除成熟红细胞外的各种细胞中, 在血小板、淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬细胞中高表达, 在眼泪、唾液、创面渗液等多种体液及渗出液中也有分布, 具有多种生物学功能^[6]。

1.1. 胸腺素β4的生物活性位点及其功能

胸腺素β4是一种多功能蛋白, 至少存在4个生物活性位点（图 1）, 在损伤修复、抗纤维化及肿瘤转移中具有多种功能。

图 1.

胸腺素β4的氨基酸序列示意图

注：图中S、D、K、P等小球分别代表丝氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、脯氨酸等氨基酸；从最左S开始, 已知的胸腺素β4的4个生物活性位点位于第1~4位氨基酸、第1~15位氨基酸、第17~23位氨基酸、最末4位氨基酸

1.1.1. 第1~4位氨基酸

胸腺素β4的前4个氨基酸可以由脯氨酰寡肽酶或N-天冬氨酰内肽酶降解为四肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）。研究人员起初观察到Ac-SDKP可以促进BALB/c小鼠血管内皮细胞增殖, 随后在注射Ac-SDKP的大鼠肿瘤球模型、大鼠角膜和心肌中均观察到血管密度增加, 证实Ac-SDKP可促进血管新生^[7]。Ac-SDKP还具有抗炎活性, 其减轻炎症反应的机制包括抑制骨髓干细胞向巨噬细胞的分化、抑制巨噬细胞的活化和迁移、减少TNF-α释放和抑制淋巴细胞增殖^[8]。Ac-SDKP在多种器官中均具有抗纤维化活性, 能够阻断Ras相关的C3肉毒素底物1信号, 进而抑制TGF-β/Smad途径分泌TGF-β₁, 抑制Fb增殖并减少胶原蛋白沉积, 从而减少病理性瘢痕的发生^[9]。使用Ac-SDKP处理从大鼠矽肺模型中分离的肌Fb后, 细胞内的α平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、纤维连接蛋白、血管紧张素Ⅱ-1型（AT1）较使用生理盐水处理的肌Fb下调, 证明Ac-SDKP可以通过肾素-血管紧张素系统中的血管紧张素转化酶/血管紧张素Ⅱ/AT1通路抑制肌Fb分化和ECM生成来抗纤维化^[10]。然而, 研究显示, Ac-SDKP在完整的胸腺素β4分子中无法发挥其生理作用, 只有当胸腺素β4裂解后才表现出其活性, 这可能是因为该位点在胸腺素β4的结构中较为隐蔽所致。

1.1.2. 第1~15位氨基酸

由第1~15位氨基酸形成的肽段中具有抗凋亡和保护细胞活性位点。氯己定具有较强的广谱杀菌活性, 但其也有一定的细胞毒性, 当其溶液质量分数达0.002%时, 可引起小鼠Fb L929细胞凋亡；当其溶液质量分数达0.016%时, 可引起L929细胞坏死^[8]。该研究显示, 胸腺素β4的第1~15位氨基酸通过改变人Fb的完整性, 可以阻断质量分数为0.002%和0.005%氯己定溶液对细胞的毒性作用, 但是不能阻断质量分数为0.01%氯己定溶液对细胞的毒性；同样, 此肽段也使细胞具有一定的抗过氧化氢、氯化苄铵、苯扎溴铵能力。

1.1.3. 第17~23位氨基酸

肌动蛋白是细胞骨架的主要成分之一, 存在于几乎所有真核细胞中, 有游离的球状肌动蛋白和多聚的纤丝状肌动蛋白（微丝）2种形式。球状肌动蛋白与微丝不停地发生聚合和解聚, 参与细胞凋亡、增殖、迁移、吞噬、免疫调节、肿瘤免疫逃逸等多种重要细胞活动^[11]。胸腺素β4是主要的球状肌动蛋白结合分子, 而其肌动蛋白结合序列为第17~23位氨基酸形成的肽段, 该肽段可与球状肌动蛋白结合, 抑制微丝解聚, 进而发挥修复真皮损伤以及诱导肥大细胞胞吐、血管新生等生理作用^[8]。

1.1.4. 羧基末端肽

胸腺素β4的羧基末端肽在不同的胸腺素中是保守的。该肽段能通过蛋白激酶B（Akt）信号通路改善心肌细胞活性、促进血管生长、减轻炎症反应^[12], 在皮肤创面愈合中的作用有待进一步研究。

1.2. 胸腺素β4与生长因子的差异

尽管胸腺素β4具有促进细胞增殖的生物学功能, 但是其本质上并非生长因子。胸腺素β4不能直接促进细胞增殖, 其主要通过激活炎症细胞, 促进其他生长因子释放, 间接促进创面修复^[13]。另外, FGF、VEGF、TGF-β、EGF等生长因子常与ECM中广泛存在的肝素及硫酸肝素结合, 当ECM被降解时, 大量结合的生长因子被释放, 进而发挥其生理作用。例如肝素硫酸糖蛋白（HSPG）可与FGF结合, 阻碍FGF与其受体结合, 当HSPG被降解后, 大量FGF被释放, 进而发挥其促生长、分化、迁移等功能。而胸腺素β4的分子量为4.9×10³, 远小于生长因子中血小板衍生生长因子B的27×10³、VEGFA的23×10³、FGF2的22×10³、EGF前体的160×10³、成熟EGF的6×10³, 且不与ECM结合, 因此, 外源性的胸腺素β4可以在组织中更好地发挥促进血管生成、细胞迁移和减轻炎症等作用。

2. 胸腺素β4在创面愈合中的作用机制

如上所述, 胸腺素β4是一种作用广泛的内源性修复因子, 研究表明胸腺素β4在皮肤创面愈合的所有阶段都具有活性。以下按照创面愈合的4个阶段阐述胸腺素β4在创面愈合中的作用机制, 见图 2、3。

图 2.

胸腺素β4在创面凝血、炎症、增生阶段的作用机制

注：IL-1为白细胞介素1, TNF-α为肿瘤坏死因子α, Bcl-2为B淋巴细胞瘤-2, Bax为Bcl-2相关X蛋白, iNOS为诱导型一氧化氮合酶

图 3.

胸腺素β4在创面重塑阶段的作用机制

注：Ac-SDKP为四肽N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸

2.1. 凝血阶段

皮肤损伤后, 暴露的血管内皮细胞和组织因子会刺激大量血小板聚集到创面局部, 而血小板中富含的高浓度的胸腺素β4随着血小板的破坏也被释放到创面中, 在谷氨酰胺转移酶的催化下选择性地与肌动蛋白、胶原蛋白和纤维蛋白交联, 促进凝血块形成^[14]。

2.2. 炎症阶段

胸腺素β4可以通过抗炎、抗凋亡、减少氧自由基这3种机制保护受损组织。胸腺素β4通过抑制核因子κB通路激活而减轻炎症反应, 减少炎症细胞释放IL-1、TNF-α等炎症因子。胸腺素β4通过下调凋亡蛋白胱天蛋白酶3表达、降低B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）与Bcl-2的比值来抗细胞凋亡, 有利于创面的细胞及组织存活^[15]。创面缺氧也会增加胸腺素β4的表达, 胸腺素β4则通过抑制诱导型NOS和环氧合酶-2, 导致活性氧减少、一氧化氮分泌减少、前列腺素2α减少, 从而减轻氧化应激, 加速创面愈合^[16]。胸腺素β4的抗炎和抗凋亡作用, 可以保护受损组织, 使其免受坏死细胞释放的细胞碎片造成的进一步损伤。

2.3. 增生阶段

血管新生对于创面愈合而言是至关重要的, 因为血液不仅可以为创面修复提供必要的营养, 还可以清除坏死细胞碎片, 从而改善创面微环境。胸腺素β4可以通过以下机制促进血管新生：（1）与球状肌动蛋白结合, 促进血管内皮细胞增殖和迁移, 形成新生毛细血管。（2）上调VEGF表达, 间接促进血管新生。（3）激活促血管再生通路, 如磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/Akt通路、Notch/核因子κB通路。胸腺素β4可诱导心肌梗死大鼠磷酸化Akt蛋白的表达, 激活下游因子, 促进血管再生；并通过上调Notch/核因子κB信号通路, 促进肢体缺血小鼠模型毛细血管新生^[17]。（4）促进循环内皮祖细胞（EPC）迁移、抑制EPC凋亡, 从而促进血管新生。EPC是造血干细胞的一种亚型, 可分化为内皮细胞。胸腺素β4可促进健康志愿者外周血中分离的EPC迁移, 并剂量依赖性地上调Akt和内皮型NOS（eNOS）信号通路的磷酸化, 从而抑制EPC凋亡, 其机制可能是胸腺素β4上调了Bcl-2/Bax比值, 稳定了线粒体膜跨膜电位, 减少了EPC对细胞色素C的释放。然而, 高糖环境会减少EPC的数量并损害其功能。目前研究表明胸腺素β4可通过Akt/eNOS信号通路改善被高糖抑制的EPC的功能, 恢复其一氧化氮的合成能力, 这可能有助于糖尿病溃疡的治疗^[18]。

2.4. 重塑阶段

在创面愈合早期, 胸腺素β4促进层粘连蛋白5（LN-5）、LN-322、肝细胞生长因子、基质金属蛋白酶（MMP）等与创面修复相关的蛋白质合成, 加速创面封闭^[19]。而在创面愈合后, 胸腺素β4及其降解成分Ac-SDKP不仅能减少纤维化/瘢痕形成, 甚至还能逆转这一过程^[20]。翟晓梅等^[21]对比了人瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、包皮组织、除包皮以外的正常皮肤组织中胸腺素β4的表达量, 结果显示这4种组织按胸腺素β4含量排列由低到高依次为瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、除包皮以外的正常皮肤组织、包皮组织, 证实胸腺素β4浓度与瘢痕形成可能存在量效关系, 局部高浓度胸腺素β4对瘢痕形成具有抑制作用, 而胸腺素β4浓度降低可能导致瘢痕增生。在人增生性瘢痕Fb中加入胸腺素β4后, Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及结缔组织生长因子的表达量较未加入胸腺素β4培养的人增生性瘢痕Fb降低, MMP-2、MMP-9的表达量增高, 而MMP-2及MMP-9是可以分解多种胶原蛋白、弹性蛋白及纤维连接蛋白的明胶酶, 这进一步证实了胸腺素β4对瘢痕的减轻作用^[22-23]。另外, 胸腺素β4可以减少肌Fb的形成, 这可能解释了其减少纤维化/瘢痕形成的原因。

3. 胸腺素β4制备工艺和药代动力学研究

早期, 研究者采用硫酸铵沉淀法、离子交换层析法直接从小牛胸腺中提取胸腺素β4。然而, 这种方法存在难以纯化、产率低的不足。随后, 美国公司采用固相合成的方法制备胸腺素β4, 得到了高纯度的胸腺素β4, 但也没有解决产率低的问题^[24]。随着基因工程的快速进展, 已有多项研究成功使用基因重组法制备胸腺素β4并将其投入生产^[25]。

作为一种多肽类药物, 胸腺素β4必须要有一定的稳定性才可被真正应用于临床治疗。虽然目前未见关于胸腺素β4制剂的体外稳定性研究, 但是从一些关于胸腺素的稳定性实验中可以了解到, 胸腺素注射用灭菌粉末在4~8 ℃的条件下可储存30个月且外观、生物活性、纯度、pH值等参数均无明显变化^[26]。体内消除速率方面, 国外一项Ⅰ期临床试验研究显示, 随着给药剂量的增大, 胸腺素β4的末端消除半衰期（t_1/2）也逐渐延长, 当给药1 260 mg时, t_1/2可达2.1 h^[27]。对于创面治疗来说, 如此短的半衰期与换药周期不相匹配, 因此Fink等^[28]将十二氢十二硼酸阴离子（一种化学性质稳定的人造无机化合物, 可用于肽链修饰以减缓药物代谢从而提高药物生物活性）与胸腺素β4偶联, 制备出性质更加稳定的胸腺素β4-十二氢十二硼酸阴离子偶合物, 其半衰期可达3~836 h（具体时长取决于十二氢十二硼酸阴离子结合到胸腺素β4的哪个氨基酸残基上）, 且不影响胸腺素β4本身活性。而Ti等^[29]则使用胶原-壳聚糖海绵支架增强了胸腺素β4的缓释效果和药物包埋量, 该支架中胸腺素β4的缓释效果可持续12 d；他们在大鼠糖尿病全层皮肤缺损创面模型中观察到, 相比仅使用纱布覆盖创面、仅使用胶原-壳聚糖海绵支架覆盖创面, 负载胸腺素β4的胶原-壳聚糖海绵支架可使创面上皮化更快、真皮重建更好、创面血管化程度更高。药物的渗透性也直接影响其作用效果。Fu等^[30]为了提高胸腺素β4的渗透性, 将其包装到醇质体凝胶中, 在小鼠深Ⅱ度碱烧伤创面模型中观察到, 使用醇质体凝胶包装胸腺素β4组的透皮率优于游离药组, 且创面愈合时间显著缩短。

药物必须达到足够的浓度才能发挥其生理功能。目前研究证实, 质量分数为0.02%~0.03%的胸腺素β4凝胶可以促进多种创面的愈合^[31]。然而, 胸腺素β4的生物学作用符合钟形曲线, 即在一定浓度范围内胸腺素β4的生物学效应随浓度增高而增强, 而超过某一浓度后, 其生物学效应反而减弱。Morris等^[32]用3种剂量的胸腺素β4治疗急性脑卒中大鼠, 结果显示, 2 mg/kg剂量组和12 mg/kg剂量组大鼠神经功能得以改善, 18 mg/kg剂量组大鼠神经功能没有改善, 他们进一步使用数学模型计算出胸腺素β4的最佳剂量为3.75 mg/kg。有研究者在压疮和大疱性表皮松解症患者中也观察到相似的剂量效应曲线, 而在3种不同的剂量中, 中等剂量胸腺素β4表现出最强的生物活性^[31]。

4. 胸腺素β4的临床前研究及临床试验

4.1. 烧伤

胸腺素β4在皮肤修复中具有多种活性, 是治疗皮肤烧伤的极佳候选药物。一些研究者在动物模型上验证了胸腺素β4促进烧伤创面愈合的疗效。有研究者观察到, 胸腺素β4可促进大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合, 而联合应用胸腺素β4与碱性FGF较单独应用胸腺素β4或碱性FGF效果好^[33-34]。国外一项深Ⅱ度烧伤小鼠模型研究显示, 每周2次皮下注射剂量为30 mg/kg的胸腺素β4溶液, 平均在伤后第10天时可使创面完全愈合, 而未给予胸腺素β4的对照小鼠创面在伤后第14天时仍没有愈合, 该研究团队分析认为胸腺素β4通过诱导PI3K/Akt信号通路的热休克蛋白70表达, 从而加速烧伤创面的愈合^[35]。

4.2. 糖尿病性创面

在26个月龄的Ⅱ型糖尿病老年小鼠全层皮肤缺损创面模型中, 研究者观察到使用胸腺素β4治疗的小鼠较使用PBS治疗的小鼠创面挛缩和胶原沉积显著增加, KC迁移增快^[36]。于虎等^[37]在糖尿病小鼠全层皮肤损伤模型上给予质量分数为0.01%、0.03%的外源性胸腺素β4后观察到, 与使用PBS的小鼠比较, 应用胸腺素β4小鼠的创面愈合率、表皮迁移率增高, VEGF及新生血管增多, 炎症细胞减少。上述实验提示胸腺素β4可能是治疗糖尿病性慢性创面的潜在药物。

4.3. 压疮

压疮是皮肤及皮下软组织在长期或剧烈的压力或剪切力下发生灌注不足导致的局部损伤, 其中Ⅲ、Ⅳ期的压疮深达皮肤全层以上, 治疗难度较大。采用胸腺素β4治疗压疮的Ⅱ期多中心随机安慰剂对照试验已经完成。该研究将纳入的72例Ⅲ、Ⅳ期压疮患者分为安慰剂组和质量分数0.01%胸腺素β4凝胶组、质量分数0.02%胸腺素β4凝胶组、质量分数0.1%胸腺素β4凝胶组, 每组18例, 每天给药4次, 持续84 d。结果显示, 所有患者均未发生不良反应, 治疗的耐受性较好；质量分数0.02%胸腺素β4凝胶组的患者在第4~9周时较其他组创面愈合更快, 但这一差异并无统计学意义（P > 0.05）^[38]。未来还需更多大样本试验探究胸腺素β4治疗压疮的效果。

4.4. 静脉性溃疡

静脉性溃疡的发病率随着年龄的增长而逐渐增加, 而迁延不愈、创面疼痛和高复发率是影响静脉性溃疡患者生存质量的主要原因^[39]。欧洲一项关于胸腺素β4治疗静脉性溃疡的多中心、随机、对照、双盲的Ⅱ期临床试验纳入了72例静脉性溃疡患者, 对患者随机给予安慰剂或质量分数0.01%、0.03%、0.1%胸腺素β4凝胶, 连续观察12周。治疗期间所有患者均能耐受, 未见严重不良反应。应用质量分数0.03%胸腺素β4凝胶的患者试验终点时创面愈合率为33.3%（6/18）, 与应用安慰剂患者的17.6%（3/17）、应用质量分数0.01%胸腺素β4凝胶患者的15.8%（3/19）、应用质量分数0.1%胸腺素β4凝胶患者的16.7%（3/18）相比, 有明显差异^[38]。可见, 适宜浓度的胸腺素β4可以有效促进静脉性溃疡的愈合。

4.5. 遗传性大疱性表皮松解症（HEB）

大疱性表皮松解症包括HEB和获得性大疱性表皮松解症这2类^[40]。HEB是一种罕见的遗传疾病, 此类疾病患者的皮肤不能很好地附着在皮下组织上, 因此轻度创伤就会导致不同程度的表皮剥脱, 而且HEB有转变为鳞状细胞癌的可能^[41]。目前针对HEB患者主要还是依靠包扎换药进行治疗, 这导致HEB患者的生活质量大大降低^[42]。胸腺素β4可以减轻炎症, 促进KC迁移黏附至创面, 以及上调LN-322的合成, 是一种治疗HEB的潜在药物^[13]。一项临床试验（NCT00311766）研究了质量分数为0.01%、0.03%和0.10%的胸腺素β4对30例HEB患者（仅纳入交界性和营养不良性HEB这2种HEB亚型）的治疗效果, 结果显示在第14天时, 3种质量分数的胸腺素β4均显示出比安慰剂更好的疗效趋势（由于HEB患者个体差异大且样本量小, 结果没有统计学差异）^[43]。然而, 对于其他类型的HEB, 胸腺素β4是否具有疗效还需要进一步探究。

5. 胸腺素β4的药物安全性试验

虽然在动物实验中没有观察到如体重减轻、肿瘤和行为迟钝等不良反应, 但一些动物实验显示胸腺素β4可促进创周毛发生长^[44]。值得注意的是, 目前已有基础研究显示, 胸腺素β4可促进乳腺癌、结肠癌等肿瘤的生长与转移^[45]。但是, 一项针对40名健康志愿者（排除有癌症家族史及癌症危险因素暴露史者）的2个阶段、为期6个月的Ⅰ期安全性试验已于2010年完成。在该试验的第1阶段中, 志愿者分别被单次静脉注射安慰剂或42、140、420、1 260 mg的胸腺素β4, 仅有3名志愿者出现药物相关不良反应（2名为应用安慰剂者、1名为应用140 mg胸腺素β4者）。在第2阶段中, 对志愿者每日静脉注射安慰剂或42、140、420、1 260 mg的胸腺素β4, 连续给药14 d, 并进行6个月的随访, 共7名志愿者发生药物相关不良反应（5例为应用安慰剂者、1例为应用140 mg胸腺素β4者、1例为应用1 260 mg胸腺素β4者）, 这些不良反应均非严重不良反应, 而且随访期间志愿者均未检出癌症^[27]。此外, 在胸腺素β4治疗大疱性表皮松解症的临床试验中, 这些易患肿瘤的患者并没有发生癌症^[16]。可见在健康的实验动物和人群中, 胸腺素β4的安全性都比较好, 但是携带肿瘤的患者能否应用胸腺素β4还有待进一步研究。

6. 小结和展望

创面愈合过程中, 多种细胞、因子及ECM的相互作用形成复杂的调控网络, 共同构成了创面微环境^[46], 选择一个既能促进创面修复又安全的因子是研究者和临床医师的共同追求。综上所述, 胸腺素β4的分子结构和生物活性都已基本研究透彻, 且该蛋白安全性较好, 目前在基础研究和临床试验中没有观察到局部或静脉注射胸腺素β4的不良反应, 也没有检测到有自身抗体产生。在促进创面愈合的研究中确定了胸腺素β4大致的最佳浓度范围为质量分数0.02%~0.03%。胸腺素β4是一种天然分子, 可以通过基因重组的方式以相对低的成本合成, 这为其临床应用提供了可能。

然而目前胸腺素β4的作用受体及信号通路尚不完全清楚, 其在创面愈合中的详细作用机制还有待进一步研究。另外, 目前在动物创面模型上进行的胸腺素β4研究已经较多, 而采用胸腺素β4治疗各类型创面的临床试验较少, 缺乏对不同病因、严重程度的创面的最佳剂量和给药方案的研究。本研究团队认为后续研究可主要聚焦以下几点：（1）探究胸腺素β4的作用受体、与其他生长因子及细胞因子的相互作用, 以便更好地为临床应用提供理论基础。（2）需要更多手段延长胸腺素β4在创面的作用时间。例如, 静电纺丝技术目前已基本成熟, 已有很多研究者将促进创面愈合的生物活性分子包埋入静电纺丝敷料进行研究^[47], 或许可将胸腺素β4纺入静电纺丝中, 既控制药物缓释, 又保护创面微环境, 一举两得。（3）仍需大量临床试验确定胸腺素β4对各种类型创面的最佳给药剂量、剂型、间隔, 以及该药物与其他促进创面愈合的药物联合应用的方案。（4）目前的安全性试验均是针对不携带肿瘤的动物或人群的, 然而临床也常见肿瘤所致的难愈性创面, 需要更多的安全性试验和更长的随访时间, 以探究给予外源性的胸腺素β4是否可以治疗该类型创面。相信随着研究的不断深化, 胸腺素β4将同生长因子一样被广泛应用于创面治疗中, 并为创面修复提供新的思路。

Funding Statement

国家自然科学基金地区科学基金项目（81660318）；包头市科技计划（2019P3038）

Regional Science Foundation Project of National Natural Science Foundation of China (81660318); Science and Technology Plan of Baotou City (2019P3038)