Table 1.

The catalytic activity of wild-type HiAXHd3, Y166A, and its variants

	Wheat arabinoxylan (arabinose release)			Sugar beet arabinan (arabinose release)			Birchwood xylan (reducing sugar release)
	kcat (min-1)	KM (M)	kcat/KM (min-1 M-1)	kcat (min-1)	KM (M)	kcat/KM (min-1 M-1)	kcat (min-1)	KM (mg ml-1)	kcat/KM (min-1 mg-1 ml)
Wild type	1.0( ± 0.13) × 104	3.5( ± 1.4) × 10-4	3.0 × 107	1.7( ± 0.1) × 103	1.3( ± 0.3) × 10-4	1.4 × 107		Inactive
Y166A	37.5 ± 8.0	2.1( ± 2.0) × 10-4	1.8 × 105	3.0 ± 0.8	6.2( ± 0.6) × 10-5	4.8 × 104	15.8 ± 3.7	3.5 ± 2.7	4.5
Y166A/N184A	26.3 ± 1.5	1.0( ± 2.9) × 10-4	2.6 × 105	12.5 ± 2.0	7.1( ± 3.2) × 10-4	1.8 × 104	78.4 ± 16	2.2 ± 1.7	35.5
Y166A/H272A		Inactive			Inactive		11.6 ± 2.7	0.9 ± 0.7	13.5
Y166A/P234A	4.95 ± 0.8	3.0( ± 1.7) × 10-4	1.6 × 104	1.7 ± 0.3	8.3( ± 4.0) × 10-4	2.0 × 103	30.2 ± 8.2	6.8 ± 4.7	4.4
Y166A/F493A	121.5 ± 40	4.9( ± 2.4) × 10-4	2.5 × 105	50.4 ± 10.6	9.4( ± 4.5) × 10-4	5.4 × 104	98.0 ± 21	5.4 ± 3.3	18.1
Y166A/F289A	11.8 ± 1.8	1.9( ± 0.7) × 10-3	6.3 × 103	2.2 ± 0.70	7.2( ± 5.8) × 10-4	3.1 × 103	26.8 ± 4.5	4.0 ± 2.1	6.7
Y166A/F270A	16.6 ±1.7	2.7( ± 0.9) × 10-4	6.1 × 104	2.2 ± 0.2	2.3( ± 0.6) × 10-4	9.4 × 103	16.8 ± 4.0	4.2 ± 1.8	4.0
Y166A/G183S	41.5 ± 6.7	8.8( ± 1.1) × 10-5	4.7 × 105		Not determined		123 ± 16	4.8 ± 0.1	25.6
Y166A/N184G	150.6 ± 9.5	1.0( ± 0.2) × 10-4	1.5 × 106		Not determined		437 ± 31	4.2 ± 0.10	104
Y166A/F493T	52.6 ± 4.2	1.3( ± 0.2) × 10-4	4.0 × 105		Not determined		76 ± 12	2.6 ± 0.0	29
Y166A/G183S/N184G/F493T	1.5( ± 0.8) × 103	5.6( ± 0.8) × 10-4	2.7 × 106		Not determined		1,145 ± 140	7.5 ± 1.1	243
Y166G/G183S/N184G/F493T	1.1( ± 0.2) × 103	1.4( ± 0.1) × 10-4	7.9 × 106	Not determined			3267±356	6.9±0.7	473
Y166A/D43A	Inactive			Inactive			Inactive
Y166A/D167A	Inactive			Inactive			Inactive
Y166A/E216A	Inactive			Inactive			Inactive