Table 3.
Primers used in this study
Primer name | Sequence 5′ → 3′ |
---|---|
Plasmid construction | |
TEF2pt-5’ | GTGGGTACCGACGTCGTATAGTGCTTGCTGTTCGATATT |
TEF2pt-3’ | GGTGGTGGTCTCGAGGATTGATTATATAAAATGTATACTTAGAAAA |
ACT1pt-5’ | GGTGGTTCTAGAAGAGCTATTAAGATCACCAGCCT |
ACT1pt-3’ | GGTGGTTTAATTAATTTGAATGATTATATTTTTTTAATATTAA |
ACT1tm-5’ | GGTGGTGGATCCGAGTGAAATTCTGGAAATCTGGA |
ACT1tm-3’ | GGTTCTAGAGACGTCATTTTATGATGGAATGAATGGGA |
Gene deletion | |
Upstream primers | |
ARG4 5’ | ATTTTGAAACAATGAATCGATGCTT |
ARG4 3’ | TCGCCCTATAGTGAGTCGTTATTAATTGATTATCTTGATAGCTGTTATG |
HIS1 5’ | GTGCCACTGTATACGCATTT |
HIS1 3’ | TCGCCCTATAGTGAGTCGTTATCGGTAGTTGGTGGTTAAGTAA |
LEU2 5’ | TTAGTTTCTATTATGGCCGTCAAT |
LEU2 3’ | TCGCCCTATAGTGAGTCGTGTTTTTTGGATATTGGTTTTAAAAGA |
Downstream primers | |
ARG4 5’ | TTCCCTTTAGTGAGGGTTAATTTATAAATAGTCATATAATAATCACAGTAT |
ARG4 3’ | TGCAAACAAACAGGGGAAAA |
HIS1 5’ | TTCCCTTTAGTGAGGGTTAAAAGAAGTGATAGTTTCTCATAAATAT |
HIS1 3’ | TCAATTATGTTGATTAGCTACAGTCA |
LEU2 5’ | TTCCCTTTAGTGAGGGTTAAACAGTATATACAGTAGTTAGCATTT |
LEU2 3’ | TTTATACCACGTGGTGACGAA |
Fusion primers | |
ARG4 5’ | CATAACAGCTATCAAGAATAATCAATTAATAACGACTCACTATAGGGCGA |
ARG4 3’ | ATACTGTGATTATTATATGACTATTTATAAAATAACCCTCACTAAAGGGAA |
HIS1 5’ | TTACTTAACCACCAACTACCGATAACGACTCACTATAGGGCG |
HIS1 3’ | ATATTTATGAGAAACTATCACTTCTTTTAACCCTCACTAAAGGGAA |
LEU2 5’ | TCTTTTAAAACCAATATCCAAAAAACACGACTCACTATAGGGCGA |
LEU2 3’ | AAATGCTAACTACTGTATATACTGTTTAACCCTCACTAAAGGGAA |
HygB 5’ | CTGGAATTGGCAAAGCAGCAGAAGCA |
HygB 3’ | TCAGCTGCTGTTTGGACTGATGGTTGT |
Nours 5’ | GTTCTCAGCATCCAATGTTTCCGCCA |
Nours 3’ | CTTCAAGTCTCGAACGAAACAGCGAT |
Verification Primers | |
ARG4 5’ | GGTTCCTGGATTTGCGCAGCCTTATA |
ARG4 3’ | CGCGATTAGAACTTGTGGACCTATCCT |
ARG4 3’A | CGTGTGATGTCAGTTGTTCAAGGTTGACT |
ARG4 3’B | GCAGTTCCAAAGATTGAAGCGTCTTCGT |
ARG4 3’C | GCTACATTACCCTCTGTTGCCACAAGCAT |
ARG4 3’D | GTCTTTGGATCGGTAGTACTGTGGCA |
HIS1 5’ | AGGAAGGTCACAGCTTGGGGTTTGAT |
HIS1 3’ | GATTGGGTGGCCATATTGTTCAAGGACA |
LEU2 5’ | TGCCAGACATATGCAAGATGAAGGGT |
LEU2 3’ | ACCCACCATTACGCAGAAGAAAGTCA |