Table 2.

Binding Assay Results of N-Methylated Ac-Nle⁴-c[Asp⁵,d-Nal(2′)⁷,Lys¹⁰]-NH₂ Analogues at hMCRs^a

								hMC1R		hMC3R		hMC4R		hMC5R
# sequence								IC50, nM	Bind-Effic	IC50, nM	Bind-Effic	IC50, nM	Bind-Effic	IC50, nM	Bind-Effic
1	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	8.7±0.9	100	3.74±0.5	97	2.4±0.2	98	6.9±1.2	98
2	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	12.6±1.8	100	23±4	97	18.2±2.1	97	6.1±1.1	98
3	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	192±20	77	20.4±3	77	16.2±2	70	16.8±2.3	77
4	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1.4±0.15	90	47.4±5.2	95	6.35±1.0	90	3.41±0.6	96
5	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	18.7±0.30	80	27.4±2.1	90	1390±310	90	27.7±3.4	90
6	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	106±21	90	3.2±0.5	90	65.9±10	90	5±0.8	90
7	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	175±20	86	17.8±2	95	111±13	89	15±1.8	94
8	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	3.9±0.5	80	1.6±0.1	90	1010±1.1	90	6±1.0	90
9	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	3110±456	82	795±90	90	1380±110	101	95±10	87
10	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	196±16	90	24.9±2.1	99	134±15	90	13±0.12	90
11	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	111±20	89	19.7±2	93	59.4±6	89	16.46±2.1	93
12	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	916±120	92	412±60	92	32.2±5	88	2260±230	72
13	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1050±116	88	3660±410	95	244±31	90	91±9	86
14	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	4.9±0.9	90	65±11	90	507±120	90	35.2±5	90
15	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	4.0±0.7	90	15.3±2.8	80	98±4.1	90	6.33±0.9	90
16	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	2520±320	86	547±70	80	1700±340	90	1670±300	90
17	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	246±45	80	9.7±1.2	90	203±7	80	6.66±1	90
18	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	246±24	80	147±23	90	549±150	90	592±70	80
19	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	242±32	74	106±13	90	100±8	79	268±31	91
20	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	256±35	84	8±11	86	722±81	81	39.7±5	90
21	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	16.7±2.2	9	2.5±06	94	3.96±1	76	2.82±0.8	90
22	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	824±1 00	68	13.7±2	38	8740±841	59	388±41	70
23	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1330±200	70	2220±242	61	99.9±10	36	159±19	67
24	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	9.4±1.2	86	51±9	78	1070±110	76	871±91	84
25	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1740±210	68	988±110	90	505±111	67	571.5±61	93
26	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1070±189	93	336±42	82	787±82	68	115±13	92
27	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1220±123	94	1270±210	92	188±21	37	1510±159	32
28	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	9.9±1.2	93	20±3	88	0.5±0.02	64	8.1±1	89
29	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1460±163	42	1670±193	97	304±35	27	4290±521	64
30	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	1380±150	87	6050±985	93	1790±190	24	1050±120	24
31	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	181 0±210	89	657±76	94	949±85	8	177±21	75
32	Nle	D	H	DNal(2′)	R	W	K	68.4±8	91	5820±200	84	3140±270	19	257±34	37

^aAmino acids with N-methyl groups are highlighted in gray. IC₅₀, concentration of peptide at 50% specific binding (N = 4). NB, 0% 125I-NDP-α- MSH displacement observed at 10 µM. Percent binding efficiency, maximal % of 125I-NDP-α-MSH displacement observed at 10 µM.