Table 1.
Mirolase cleavage specificity.
P4 | P3 | P2 | P1 | KM[μM] | kcat[s−1] | kcat/KM [M−1s−1] | ||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Suc | Ala | Ala | Pro | Glu | pNA | n.h. | ||
Suc | Ala | Ala | Pro | Phe | pNA | 62±19 | 2.27±0.16 | (3.7±1.4)×104 |
Suc | Ala | Ala | Pro | Val | pNA | n.h. | ||
Suc | Ala | Ala | Pro | Leu | pNA | 625±42 | 5.8±0.21 | (9.3±0.9)×103 |
Suc | Ala | Ala | Pro | Ile | pNA | n.h. | ||
Suc | Ala | Ala | Pro | Asp | pNA | n.h. | ||
Suc | Ala | Ala | Pro | Arg | pNA | n.h. | ||
Suc | Ala | Ala | Pro | Ala | pNA | 713±259 | 1.24±0.25 | (1.7±1)×103 |
MSuc | Ala | Ala | Phe | Ala | pNA | n.h. | ||
Suc | Phe | Pro | Phe | pNA | n.h. | |||
Suc | Ala | Ala | Ala | pNA | n.h. | |||
Suc | Ala | Ala | Val | pNA | n.h. | |||
Z | Gly | Gly | Leu | pNA | n.h. | |||
ptos | Gly | Pro | Lys | pNA | n.h. | |||
Suc | Val | Pro | Phe | pNA | n.h. | |||
Suc | Phe | Pro | Phe | pNA | n.h. | |||
Ala | Ala | Phe | pNA | n.h. | ||||
Val | Leu | Arg | pNA | n.h. | ||||
Suc | Gly | Arg | pNA | n.h. | ||||
Z | Gly | Pro | pNA | n.h. | ||||
Ala | Phe | pNA | n.h. | |||||
benzo | Arg | pNA | n.h. | |||||
Phe | pNA | n.h. | ||||||
Leu | pNA | n.h. | ||||||
Gly | pNA | n.h. |
The activity assay was performed in 50 mM Tris-HCl, pH 8.0. with the appropriate substrate at final concentration 250 μM. Substrates hydrolysed by mirolase are in bold. (n.h. – no hydrolysis).