Table S1.

Determined binding constants for the C2 domains of otoferlin with Loop1.3 or t-SNARE

Free calcium concentration	C2A		C2B		C2C		C2D		C2E		C2F
	Loop1.3 (μM)	SNAREs (μM)	Loop1.3 (μM)	SNAREs (μM)	Loop1.3 (μM)	SNAREs (μM)	Loop1.3 (μM)	SNAREs (μM)	Loop1.3 (μM)	SNAREs (μM)	Loop1.3 (μM)	SNAREs (μM)
0.1 μM Ca2+	0.31 ± 0.03	0.56 ± 0.06	0.07 ± 0.01	1.19 ± 0.01	—	1.04 ± 0.04	0.03 ± 0.02	—	—	1.17 ± 0.01	—	—
1 μM Ca2+	0.28 ± 0.02	0.57 ± 0.07	0.35 ± 0.04	1.00 ± 0.01	—	1.24 ± 0.01	0.12 ± 0.02	—	—	1.09 ± 0.01	—	1.79 ± 0.03
15 μM Ca2+	0.44 ± 0.03	0.46 ± 0.01	0.80 ± 0.01	0.09 ± 0.02	—	0.66 ± 0.01	0.50 ± 0.08	—	—	0.49 ± 0.09	0.75 ± 0.01	0.83 ± 0.01
30 μM Ca2+	0.31 ± 0.04	0.46 ± 0.02	1.51 ± 0.03	0.07 ± 0.01	—	0.10 ± 0.01	0.88 ± 0.02	—	—	0.30 ± 0.07	0.51 ± 0.01	0.05 ± 0.02
50 μM Ca2+	0.38 ± 0.04	0.59 ± 0.02	0.29 ± 0.03	0.07 ± 0.01	—	0.15 ± 0.05	0.90 ± 0.08	—	—	0.09 ± 0.01	0.74 ± 0.05	0.04 ± 0.02