Table 2.

Multistep Slow-cooling Cryopreservation Protocols Using Controlled Rate Freezer.

Step	Start Temperature	Rate	Time	End Temperature
Protocol for human hepatocytes24
1	8 °C	−1 °C/min	8 min	0 °C
2	0 °C	Hold	8 min	0 °C
3	0 °C	−2 °C/min	4 min	−8 °C
4	−8 °C	−35 °C/min	33 s	−28 °C
5	−28 °C	−2.5 °C/min	2 min	−33 °C
6	−33 °C	+2.5 °C /min	2 min	−28 °C
7	−28 °C	−1 °C/min	32 min	−60 °C
8	−60 °C	−10 °C/min	4 min	−100 °C
9	−100 °C	−20 °C/min	2 min	−140 °C
Protocol for encapsulated liver spheroids25
1	0 °C	Hold	8 min	0 °C
2	0 °C	−2 °C/min	4 min	−8 °C
3	−8 °C	−35 °C/min	6 s	−28 °C
4	−28 °C	−2.5 °C/min	2 min	−33 °C
5	−33 °C	+2.5 °C/min	2 min	−28 °C
6	−28 °C	−2 °C/min	16 min	−60 °C
7	−60 °C	−10 °C/min	4 min	−100 °C
8	−100 °C	−20 °C/min	3 min	−160 °C