Table 2.

Tissue culture medium composition used in this protocol

Purpose	Medium name	Composition
Callus induction	CIM	NB0 medium (pH 5.8) (3 mg l−1 2,4-d + 0.2 mg l−1 BAP + 500 mg l−1 l-proline)
Callus resting	CRM	MS medium (pH 5.8) (5 mg l−1 2,4-d + 1 mg l−1 BAP + 2 g l−1 l-proline + 200 mg l−1 Timentin)
Callus selection	CSM	MS medium (pH 5.8) (5 mg l−1 2,4-d + 1 mg l−1 BAP + 2 g l−1 l-proline + 200 mg l−1 Timentin) (50–100 mg l−1 hygromycin B)
Regeneration	REG	MS medium (pH 5.8) (2 mg l−1 BAP + 1 mg l−1 IAA + 1 mg l−1 kinetin + 1 mg l−1 NAA + 500 mg l−1 l-proline + 200 mg l−1 Timentin) (20 mg l−1 hygromycin B)
Rooting	RM	1/2 MS salts + 30 g l−1 maltose (pH 5.8) (200 mg l−1 Timentin + 50 mg l−1 hygromycin B)

NB₀ medium, NB Basal Medium + 30 g l⁻¹ maltose + 300 mg l⁻¹ casein enzymatic hydrolysate (CH) + 6.5 g l⁻¹ agar MS medium, MS Basal medium with vitamins + 30 g l⁻¹ maltose + 6.5 g l⁻¹ agar or 3 g l⁻¹ phytagel (in REG)