Table 3.

Cycling parameters for the second step PCR.

Denaturation	2 min	95 °C
Denaturation	15 s	94 °C	5 cycles
Annealing	30 s	45 °C
Elongation	1 min/kb	68 °C
Denaturation	15 s	94 °C	15–20 cycles
Annealing	30 s	55 °C
Elongation	1 min/kb	68 °C
Elongation	10 min	68 °C