Embryoid body (EB) differentiation medium

Reagent	Final concentration	IMDM 20%	Day 0	Day 2	Day 4
FBS (heat inactivated at 56°C for 30 min)	20%	20 mL	n/a	n/a	n/a
L-Glutamine (200 mM)	0.2 mM	1 mL	1 mL	1 mL	1 mL
Transferrin (20 mg/mL)	0.15 mg/mL	0.75 mL	0.75 mL	0.75 mL	0.75 mL
MTG (0.150 M)	4.5 × 10−4 M	0.3 mL	0.3 mL	0.3 mL	0.3 mL
Ascorbic acid (5 mg/mL)	0.05 mg/mL	1 mL	1 mL	1 mL	1 mL
Geltrex (1:5 dilution)	1:5,000	0.1 mL	0.1 mL	n/a	n/a
ROCK inhibitor (100 mM)	10 μM	0.01 mL	0.01 mL	n/a	n/a
BMP4 (10 μg/mL)	10 ng/mL	n/a	0.1 mL	0.1 mL	n/a
FGF2 (10 μg/mL)	5 ng/mL	n/a	n/a	0.05 mL	0.05 mL
Activin A (5 μg/mL)	0.9 ng/mL	n/a	n/a	0.018 mL	n/a
VEGF (10 μg/mL)	12 ng/mL	n/a	n/a	n/a	0.12 mL
IMDM	n/a	76.95 mL	n/a	n/a	n/a
StemPro 34 (pen/strep 1%)	n/a	n/a	96.95 mL	96.95 mL	96.95 mL
Total	n/a	100 mL	100 mL	100 mL	100 mL