Preparation of Extraction buffer I (containing 0.4 M NaCl)

Reagent	Final concentration	Amount
1 M HEPES pH 7.4	5 mM	5 μL
3 M KCl	2 mM	0.6 μL
0.5 M EDTA	2 mM	4 μL
5 M NaCl	0.4 M	80 μL
10% Triton-X-100	0.5%	50 μL
0.1 M PMSF	1 mM	10 μL

Adjust final volume to 1 mL with deionized water. Prepare fresh before every use. Store at 25°C for the day.