Table 1.

Primers used for generating Pfnek3 site-directed mutants

Mutation	Sequence of mutagenic primers (5′-3′)
Y99F	F: gtgatgagatatttatatctaaggtatatg R: taccttagatataaatatctcatcactttc
Y117F	F: gatttgaataaatttatgaatgaattatata R: taattcattcataaatttattcaaatcatc
Y117D	F: gatttgaataaagatatgaatgaattatata R: taattcattcatatctttattcaaatcatc
Y117E	F: gatttgaataaagaaatgaatgaattatata R: taattcattcatttctttattcaaatcatc
Y122F	F: tgaatgaattatttataatgaataagttaag R: cttattcattataaataattcattcatatattta
Y122D	F: tgaatgaattagatataatgaataagttaag R: cttattcattatatctaattcattcatatattta
Y122E	F: tgaatgaattagaaataatgaataagttaag R: cttattcattatttctaattcattcatatattta
Y172F	F: aataatgaaatatttacagaaagtgaaata R: ttcactttctgtaaatatttcattatttaatttc
Y172D	F: aataatgaaatagatacagaaagtgaaata R: ttcactttctgtatctatttcattatttaatttc
Y172E	F: aataatgaaatagaaacagaaagtgaaata R: ttcactttctgtttctatttcattatttaatttc
Y238F	F: aattgtttaagttttgaatcaattaaatttaag R: atttaattgattcaaaacttaaacaatttaatg
Y238D	F: aattgtttaagtgatgaatcaattaaatttaag R: atttaattgattcatcacttaaacaatttaatg
Y238E	F: aattgtttaagtgaagaatcaattaaatttaag R: atttaattgattcttcacttaaacaatttaatg
Y286F	F: gaggataaaaattttaaaagctatattatc R: aatatagcttttaaaatttttatcctcaaaaag

The designations F and R denote the forward and reverse primers, respectively, with the sites of mutagenesis underlined