Skip to main content
NCBI home page
Journal of Southern Medical University logoLink to Journal of Southern Medical University
. 2021 Nov 20;41(11):1623–1630. [Article in Chinese] doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2021.11.05

从心论治方改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化及上调ACE2蛋白表达

Congxin Lunzhi Fang improves aortic atherosclerosis and regulates ACE2 expression in ApoE-/- mice

顾 毓艳 1,2, 蒋 晶 1,2, 张 雅心 1, 陈 育尧 1, 陈 奕澔 1, 江 伟豪 1, 黄 志勇 2, 周 凤华 1,*
PMCID: PMC8685714  PMID: 34916187

Abstract

目的

探讨从心论治方（CXLZF）对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）损伤的作用机制。

方法

采用高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠12周建立AS模型，随机分为模型组，CXLZF低（4.5 g·kg-1·d-1）、中（9 g·kg-1·d-1）、高（18 g·kg-1·d-1）剂量组，辛伐他汀（5 mg·kg-1·d-1）组，同时以普通饮食喂养C57BL/6小鼠作为对照组，6只/组。各组小鼠给予相应药物灌胃，对照组、模型组灌胃等体积生理盐水，干预12周。分别采用油红O、Masson、HE染色法观察斑块及肝脏病变情况，检测血脂、血糖及肝功指标；Western blotting法检测血管紧张素转换酶2（ACE2）、E-选择素（E-selectin）蛋白表达，免疫荧光法对ACE2蛋白表达进行定位。在体外，以CXLZF灌胃SD大鼠制作含药血清、生理盐水灌胃大鼠制作对照血清后，采用100 μg/m L ox-LDL干预人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立细胞损伤模型，CXLZF含药血清（5%、10%、20%）干预人脐静脉内皮细胞，对照组、模型组细胞给予10%对照血清。检测细胞ACE2表达。

结果

CXLZF低、中、高剂量干预均有效缩小AS小鼠主动脉斑块面积，增加斑块稳定性；同时，CXLZF干预显著降低AS小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平（P < 0.05），高剂量组降脂效果最佳；CXLZF干预还可降低AS小鼠血清天门冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶含量（P < 0.05）、改善肝脏脂肪变性。CXLZF干预显著上调AS小鼠主动脉ACE2、下调E-selectin表达（P < 0.05）。细胞实验中，CXLZF含药血清（5%、10%、20%）显著上调氧化低密度脂蛋白干预人脐静脉内皮细胞的ACE2表达（P < 0.05）。

结论

CXLZF可有效减轻小鼠AS损伤，可能与调控ACE2蛋白有关。

Keywords: 从心论治方, 动脉粥样硬化, 血管紧张素转换酶2

心脑血管疾病目前已成为世界范围内的主要死亡原因，动脉粥样硬化（AS）是其主要病理基础[1]。内皮细胞功能障碍和损伤是粥样硬化病变的始动因素，肾素- 血管紧张素系统（RAS）是心血管稳态的关键调节剂，在调节内皮细胞功能中具有重要作用[2]。血管紧张素转换酶2（ACE2）可将血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）代谢为无活性的血管紧张素（1-7）（Ang（1-7））[3]。ACE2和Ang（1-7）能降低内皮细胞分泌的细胞黏附分子浓度，减轻AngⅡ诱导炎症反应，从而抑制AS早期病变形成[4, 5]，因此ACE2可能是防治AS性疾病的重要靶点[6]。

他汀类药物是目前AS临床治疗的一线用药，但其引起的肝肾损伤和肌肉溶解等副作用明显降低患者生存质量[7, 8]。课题组前期发现，中药从心论治方（CXLZF）在体内可减轻小鼠高脂血症[9]，在体外能减轻ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞损伤[10]，但其是否能抗AS作用不清。因此，本研究拟采用高脂饮食（HFD）喂养ApoE-/-小鼠建立AS模型，从ACE2途径探讨CXLZF防治AS药理机制，为CXLZF临床应用提供必要的实验依据。

1. 材料和方法

1.1. 实验动物

健康雄性8周龄SPF级ApoE-/-小鼠30只和6只同周龄C57BL/6小鼠，体质量19~21 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物许可证号：SCXK（京）2016-0006。SPF级成年雄性SD大鼠30只，体质量约200 g，购于南方医科大学实验动物中心。饲养环境：SPF级，室温22~24 ℃，相对湿度为50%，12 h光/暗循环。本实验经南方医科大学实验动物伦理委员会批准。

1.2. 药物

CXLZF由黄连15 g（批号：HX18D01）、丹参15 g（批号：HX18D01）、酸枣仁20 g（批号：HX18F01）、灵芝10 g（批号：HX18D01）组成，全部药物购自南方医科大学南方医院。

1.3. 动物模型及给药

小鼠适应性喂养1周后，以6只C57BL/6小鼠作为对照组，30只ApoE-/-小鼠随机分为模型组（HFD）、CXLZF低、中、高剂量组（CL、CM、CH）及辛伐他汀组（S），6只组。除对照组给予普通饲料外，其于组均给予高脂饲料。高脂饮食12周成功复制AS模型后[11]，分别给予CXLZF低、中、高剂量（4.5、9、18 g·kg-1·d-1）、辛伐他汀（5 mg·kg-1·d-1）灌胃，对照组、模型组以等体积生理盐水灌胃，1次/d，每周5 d，连续12周。末次给药后禁食12 h，给予10%水合氯醛麻醉小鼠后眼球取血、收集组织。

1.4. CXLZF含药血清制备

制备终质量浓度为2.31 g/mL的CXLZF水煎液；30只雄性SD大鼠随机分为实验组（n=20），对照组（n= 10）；实验组大鼠每日早晚各灌胃2 mL CXLZF药液，对照组灌胃同体积生理盐水，连续7 d。末次灌胃1 h后，麻醉动物行腹主动脉取血，分离血清。灭菌后-20 ℃保存。

1.5. 细胞培养、实验分组

人脐静脉内皮细胞（HUVECs，ZQ00446）购自上海中乔生物科技公司。采用含10% FBS的DMEM培养基，置于饱和湿度、5% CO2浓度及37 ℃恒温孵育箱中培养，细胞长满至培养皿80%~90%时，用0.25%胰酶消化传代，取对数增长期细胞进行实验。细胞分为：对照组（10%对照组大鼠血清）、模型组100 μg/m L氧化低密度脂蛋白（ox-LDL），CXLZF含药血清低中高剂量组（分别用5%，10%，20%含药血清孵育2 h，加入ox-LDL干预24 h）。

1.6. 试剂及仪器

油红O（ORO）染色试剂盒、Masson染色试剂盒、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）检测试剂盒、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）；小鼠ACE2抗体、小鼠E-selection抗体（Proteintech中国公司）；小鼠血管紧张素（1-7）ELISA试剂盒（南京卡米洛生物工程有限公司）；荧光显微镜（广州市德真科技有限公司），化学发光法成像系统（广州誉维生物科技仪器有限公司）。

1.7. 病理切片染色

收集小鼠主动脉根部、主动脉、肝脏制备切片。按照制造商指示方案进行ORO、Masson、苏木素伊红（HE）染色，封片后病理显微镜观察拍照。

1.8. 葡萄糖、胰岛素耐受试验

在第24周，小鼠接受胰岛素耐受试验（ITT），禁食6 h后，以0.75 U/kg体质量腹腔注射胰岛素。分别检测胰岛素注射前（0 min）和胰岛素注射后15、30、60和120 min时小鼠血糖。

1.9. ELISA

根据试剂盒说明书进行操作检测小鼠血清Ang（1-7）水平，步骤如下：在标准孔中加入标准品及小鼠血清（10倍稀释），37 ℃孵育60 min，洗涤后依次加入检测抗体Ang（1-7）、生物荧光色标记抗体、链霉亲和素HRP，分别在37 ℃孵育30 min。加入显色液避光显色15 min，终止液终止，450 nm波长检测吸光度。

1.10. Western blotting

采用RIPA裂解液（含10% PMSF）提取小鼠主动脉蛋白，BCA法测定蛋白浓度。60μg蛋白经10%SDS-PAGE电泳分离后转膜，采用5%脱脂牛奶室温封闭2 h，采用5%脱脂牛奶室温封闭2 h，一抗（ACE2、E-selection，1∶500）4 ℃孵育过夜；TBST洗膜3×5 min，辣根过氧化酶标记二抗（1∶3000）室温孵育1 h，TBST洗膜3×5 min。ECL法发光显色，Image J软件分析。

1.11. 免疫荧光

冰冻切片采用多聚甲醛固定15 min，0.25% Triton X-100通透10 min，10 %山羊血清封闭1 h后，一抗（ACE2，1∶250）4 ℃孵育过夜；再用DyLight 549荧光二抗（1∶400）室温避光孵育2 h，采用DAPI染色10 min，以防荧光淬灭剂封片。切片在荧光显微镜下观察拍照。

1.12. 统计学方法

采用SPSS 22软件进行统计分析，数据以均数±标准差表示。若符合正态分布和方差齐性，使用单因素方差分析和T检验。方差不齐时，使用Welch方差分析和Welch校正T检验。P < 0.05认为差异有统计学意义。

2. 结果

2.1. CXLZF减轻AS小鼠主动脉斑块损伤

与对照组相比，模型组小鼠有明显AS斑块形成（图 1）。CXLZF干预后显著减小斑块面积，其中高剂量组效果更显著。CXLZF组与辛伐他汀组相比无显著差异。此外，CXLZF可增加AS斑块胶原纤维含量（图 2），提示斑块更稳定。结果表明，CXLZF可显著减轻AS斑块损伤。

1.

1

Open in a new tab

主动脉窦ORO染色

Oil red O staining of the aortic root in different groups (Original magnification: ×40). A: Control group. B: Model group. C: Simvastatin group. D: Low-CXLZF dose group. E: medium-CXLZF dose group. F: HighCXLZF dose group.

2.

2

Open in a new tab

主动脉窦Masson染色

Masson staining of the aortic root in different groups (× 40). A: Control group. B: Model group. C: Simvastatin group. D: Low-CXLZF dose group. E: medium-CXLZF dose group. F: High-CXLZF dose group.

HE染色显示（图 3），与对照组相比，模型组主动脉厚薄不均，内皮下可见有沉着的脂滴及泡沫状细胞，动脉壁结构破坏，弹力纤维断裂，平滑肌数量减少，CXLZF能改善AS小鼠主动脉病理改变。

3.

3

Open in a new tab

主动脉HE染色

HE staining of the aortic tissue in different groups (× 100). A: Control group. B: Model group. C: Simvastatin group. D: Low-CXLZF dose group. E: medium- CXLZF dose group. F: High-CXLZF dose group.

2.2. CXLZF改善AS小鼠血糖和血脂

ITT结果显示（表 1），与对照组相比，模型组血糖浓度明显升高（P < 0.05），CXLZF可降低血糖，在胰岛素注射第120 min时高剂量作用明显（P < 0.05）。

1.

小鼠ITT结果

Results of ITT in mice (Mean±SD, n=6)

Group Glucose (mmol/L)
0 min 15 min 30 min 60 min 120 min
HFD: Model group, S: Simvastatin group, CL: Low-CXLZF dose group, CM: Medium-CXLZF dose group, CH: High-CXLZF dose group. #P < 0.05, ##P < 0.01 vs control group; *P < 0.05 vs model group.
Control 7.25±1.05 4.78±1.92 3.55±1.57 3.15±1.67 4.58±2.11
HFD 9.47±1.45# 9.20±1.04# 6.70±0.34 5.85±0.93# 9.78±2.70##
CL 10.85±0.76 9.35±1.82 6.63±1.12 6.82±0.97 7.90±0.57
CM 10.05±1.13 8.50±1.93 7.47±1.32 6.70±1.00 7.28±0.84
CH 10.02±1.45 7.40±2.08 6.17±0.47 6.25±0.62 6.48±0.75*
S 10.68±0.81 6.88±1.89 6.70±0.90 8.70±2.60* 8.53±3.23
Open in a new tab

与对照组相比，模型组体质量显著增加（P < 0.01），而CXLZF可明显抑制小鼠体质量增长，中、高剂量组效果最佳（P < 0.01，表 2）。此外，与对照组相比，模型组小鼠TG、TC、LDL-C浓度分别增加5.03、7.72、3.06倍（P < 0.05），HDL-C浓度下降无统计学意义（P>0.05）。CXLZF能显著降低小鼠TG、TC、LDL-C浓度（P < 0.05），且呈剂量依赖性改变。

2.

小鼠血脂水平

Blood lipid levels of the mice (Mean±SD, n=6)

Group Weight gain (g) TC (mmol/L) TG (mmol/L) LDL-C (mmol/L) HDL-C (mmol/L)
#P < 0.05, ##P < 0.01 vs control group; *P < 0.05, **P < 0.01 vs model group.
Control 8.50±1.39 3.37±0.70 1.01±1.04 2.03±0.91 2.45±0.88
HFD 19.30±5.81## 16.94±1.32## 7.72±2.20## 6.21±1.35## 2.26±0.53
CL 12.02±1.25 14.63±1.37 4.53±0.67** 3.96±1.17* 3.03±1.10
CM 7.90±0.88** 13.36±0.63** 3.61±1.50** 3.51±0.50** 2.60±0.53
CH 8.64±2.86** 12.04±2.713** 3.32±0.34** 3.10±0.87** 3.11±0.61
S 9.41±5.32* 11.42±2.78** 3.61±1.49** 2.39±0.61** 2.81±1.15
Open in a new tab

2.3. CXLZF改善AS小鼠肝损伤

肝脏病理染色显示（图 4），与对照组相比，模型组肝索排列紊乱，大量肝细胞严重脂肪变性，细胞结构模糊，胞核固缩或碎裂，坏死区和肝窦内可见大量炎细胞浸润。CXLZF及辛伐他汀均能显著减轻肝脏脂肪样性及炎性细胞浸润。ORO结果显示（图 5），与对照组相比，模型组脂质沉积明显，CXLZF干预能显著减少肝脏脂质沉积。

4.

4

Open in a new tab

肝脏HE染色

HE staining of the liver tissue in different groups (× 200). A: Control group. B: Model group. C: Simvastatin group. D: Low-CXLZF dose group. E: medium-CXLZF dose group. F: High-CXLZF dose group.

5.

5

Open in a new tab

肝脏ORO染色

Oil red O staining of the liver tissue in different groups (×400). A: Control group. B: Model group. C: Simvastatin group. D: Low-CXLZF dose group. E: medium-CXLZF dose group. F: High-CXLZF dose group

与模型组相比，CXLZF组小鼠肝脏指数降低（P < 0.05）。此外，模型组血清ALT、AST浓度显著高于对照组（P < 0.01），CXLZF和辛伐他汀均可明显降低ALT、AST水平（P < 0.05）。由此可见，CXLZF可有效改善HFD诱导肝脏损伤（表 3）。

3.

小鼠肝功指标

Index of liver function of the mice (Mean±SD, n=6)

Group Weight of liver (g) Index of liver (%) ALT (U/L) AST (U/L)
#P < 0.05, ##P < 0.01 vs control group; *P < 0.05, **P < 0.01 vs model group.
Control 1.59±0.16 5.13±0.70 10.40±0.25 15.71±1.06
HFD 1.99±0.32 5.45±0.63 40.76±2.26## 58.82±10.88##
CL 1.74±0.23 4.41±0.33* 23.83±1.10* 51.93±6.10
CM 1.63±0.22 4.48±0.53 19.91±0.67* 43.37±1.42*
CH 1.60±0.31 4.37±0.53* 13.97±0.56** 38.15±1.64**
S 1.53±0.59 4.50±0.25 15.44±2.37** 41.89±8.16**
Open in a new tab

2.4. CXLZF可上调AS小鼠ACE2表达

如图 6A所示，与对照组相比，模型组小鼠ACE2明显降低（0.64倍，P < 0.05），CXLZF可上调ACE2蛋白水平，高剂量作用最为明显（2.27倍，P < 0.05）；此外，CXLZF还可降低E-selectin浓度（P < 0.05）。

6.

6

Open in a new tab

各组主动脉ACE2、E-selectin，血清Ang（1-7）水平

Protein expressions of ACE2, E-selectin and Ang (1- 7) in different groups. HFD: Model group, CL: Low-CXLZF dose group, CM: Medium-CXLZF dose group, CH: High-CXLZF dose group. #P < 0.05; *P < 0.05 vs model group.

免疫荧光显示（图 7），在AS斑块内，ACE2蛋白表达主要位于胞浆。与模型组相比，CXLZF组斑块胞浆内红色荧光显著增加，提示中药可上调ACE2蛋白表达。ELISA结果显示（图 6B），CXLZF可上调AS小鼠血清Ang（1-7）浓度，但结果无统计学意义。

7.

7

Open in a new tab

主动脉斑块ACE2免疫荧光染色

Immunofluorescence staining ofACE2 in the aortic root in different groups (×200).

2.5. CXLZF上调ox-LDL干预HUVEC细胞的ACE2表达

如图 8A所示，与对照组相比，模型组HUVEC细胞中ACE2蛋白表达明显降低（0.83倍，P < 0.05），CXLZF可上调ACE2蛋白水平，中剂量作用最为明显（2.27倍，P < 0.05）；此外，CXLZF含药血清干预可显著上调ox-LDL干预引起Ang基因表达量下降（图 8B，P < 0.05）。

8.

8

Open in a new tab

CXLZF上调ox-LDL干预HUVEC细胞的ACE2表达

CXLZF up- regulates the protein of ACE2 (A) and the mRNA of Ang (B) expression in HUVECs. ox-LDL: model group, CL: Low-CXLZF dose group, CM: medium-CXLZF dose group, CH: high-CXLZF dose group. #P < 0.05 vs control group; *P < 0.05 vs model group.

3. 讨论

本研究旨在探讨CXLZF对高脂喂养ApoE-/-小鼠AS损伤的影响及机制。我们发现，CXLZF可明显减轻小鼠斑块损伤，改善小鼠血糖血脂水平及肝脏脂肪变性。在RAS系统中，CXLZF可增加主动脉ACE2蛋白含量，减少黏附分子表达。我们推测，ACE2可能是CXLZF改善小鼠AS损伤的靶点之一。

CXLZF由黄连、丹参、酸枣仁、灵芝组成，来源于南方医院中医科治疗冠心病的经验方定心方。AS的中医辨证实为痰湿瘀毒互结之证，治则以祛湿解毒活血为要，CXLZF君药为入中焦脾胃肝胆经之黄连，取其清热祛湿解毒功效，臣以入心、肝经之丹参活血化瘀消痈，佐以酸枣仁养心补肝，宁心安神。以灵芝滋补强壮为使药，缓和君药黄连之苦寒。四味药材共奏清热祛湿、活血解毒、扶正益气之功效。前期研究发现，CXLZF在体内可改善小鼠高脂血症[10]，在体外能减轻ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞损伤[10]。

ApoE是血液中脂蛋白的重要组分，在胆固醇和脂蛋白代谢调节中起主要作用，ApoE基因敲除小鼠可自发形成AS，且在病理及组织学形态上与人类极其相近，HFD喂养的ApoE-/-小鼠是目前研究AS的常用动物模型之一[12, 13]。HFD喂养ApoE-/-小鼠后可诱导血管内皮细胞激活，促进单核细胞和血管平滑肌细胞吞噬脂质形成泡沫细胞。泡沫细胞在动脉内膜中堆积形成脂质斑块[14, 15]，斑块面积可反映AS损伤程度。我们发现，CXLZF可减小ApoE-/-小鼠主动脉斑块面积。此外，斑块稳定性也是评估AS损伤程度的重要指标[16, 17]，胶原纤维含量越多，斑块越稳定。与模型组相比，CXLZF显著增加斑块中胶原纤维含量。提示CXLZF能显著减轻AS损伤，其作用可能与方中主要成分黄连素、丹参酮Ⅱ A和灵芝多糖等有关。已有研究表明，以上活性成分均具有改善AS斑块损伤作用[16, 17]。

AS与脂质代谢紊乱密切相关，血脂升高是AS发病的重要危险因素[17]。其中，低密度脂蛋白能增加动脉壁胆固醇内流和沉积，促进AS形成，高密度脂蛋白能通过抑制固醇内流和沉积阻止AS发生发展[21]。本研究发现，CXLZF可明显改善AS小鼠血脂水平，包括降低TC、TG、LDL-C，但对HDL-C调节作用不明显。血糖升高也是AS发病的重要危险因素，CXLZF能改善AS小鼠血糖，可能主要与君药黄连降糖作用有关[21-23]。可见，CXLZF能有效调节AS小鼠血糖血脂水平，延缓AS进展。

HFD诱导肝脏脂质积累能加重小鼠AS损伤[24, 25]。本研究中，高脂喂养24周后ApoE-/-小鼠肝脏出现明显脂肪变性，ALT与AST水平显著升高，而CXLZF能显著改善小鼠肝脏损伤。提示CXLZF抗AS损伤可能主要与减轻HFD诱导的斑块形成及肝脏病变有关。

内皮细胞功能障碍是AS病变的始动因素，RAS在内皮细胞功能调节中具有重要作用，其主要成员ACE2可通过改善内皮功能、局部炎症、脂质沉积等抗AS损伤[26, 27]。我们发现，CXLZF可显著上调AS小鼠主动脉ACE2蛋白表达，同时，CXLZF含药血清可上调ox-LDL干预HUVEC细胞的ACE2蛋白表达，ACE2增加可下调E-selectin蛋白水平，其是炎症早期出现的黏附分子，也是血管内皮细胞受损的标志[28-30]。此外，ACE2可上调Ang（1-7）水平，其可通过保护血管内皮细胞、减轻炎症反应及氧化应激等发挥抗动脉粥样硬化作用[28, 31-34]。本实验中，CXLZF可使AS小鼠血清中Ang（1-7）含量呈增长趋势，CXLZF含药血清可上调ox-LDL干预HUVEC细胞中Ang基因表达。因此我们推测，CXLZF可能通过ACE2蛋白调节RAS系统、减少黏附分子表达，从而减轻AS损伤。

综上所述，中药CXLZF能有效减轻HFD诱导的ApoE-/-小鼠AS损伤，改善小鼠血糖血脂水平及肝功能，机制可能与调节ACE2蛋白表达有关，但如何调控还需进一步研究。

Biographies

顾毓艳，在读硕士研究生，E-mail: guyuyan2021@126.com

蒋晶，在读硕士研究生，E-mail: jiangjing200909@126.com

Funding Statement

国家自然科学基金（81774213）；广东省中医药局科研项目（20201233）

Supported by National Natural Science Foundation of China (81774213)

Contributor Information

顾 毓艳 (Yuyan GU), Email: guyuyan2021@126.com.

蒋 晶 (Jing JIANG), Email: jiangjing200909@126.com.

周 凤华 (Fenghua ZHOU), Email: wendyzhou515@126.com.

References

  • 1.Arnett DK, Blumenthal RS, Albert MA, et al. 2019 ACC/AHA guideline on the primary prevention of cardiovascular disease: a report of the American college of cardiology/American heart association task force on clinical practice guidelines. http://d.wanfangdata.com.cn/periodical/6ecc1550ae9c47f33920db1b03c3e196. Circulation. 2019;140(11):e596–646. doi: 10.1161/CIR.0000000000000678. [Arnett DK, Blumenthal RS, Albert MA, et al. 2019 ACC/AHA guideline on the primary prevention of cardiovascular disease: a report of the American college of cardiology/American heart association task force on clinical practice guidelines[J]. Circulation, 2019, 140(11): e596-646.] [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 2.Zhang YH, Zhang YH, Dong XF, et al. ACE2 and Ang-(1-7) protect endothelial cell function and prevent early atherosclerosis by inhibiting inflammatory response. http://www.onacademic.com/detail/journal_1000037497663710_3a20.html. Inflamm Res. 2015;64(3/4):253–60. doi: 10.1007/s00011-015-0805-1. [Zhang YH, Zhang YH, Dong XF, et al. ACE2 and Ang-(1-7) protect endothelial cell function and prevent early atherosclerosis by inhibiting inflammatory response[J]. Inflamm Res, 2015, 64(3/4): 253-60.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 3.Zhou XM, Zhang P, Liang T, et al. Relationship between circulating levels of angiotensin-converting enzyme 2-angiotensin-(1: 7)-MAS axis and coronary heart disease. Heart Vessel. 2020;35(2):153–61. doi: 10.1007/s00380-019-01478-y. [Zhou XM, Zhang P, Liang T, et al. Relationship between circulating levels of angiotensin-converting enzyme 2-angiotensin-(1: 7)-MAS axis and coronary heart disease[J]. Heart Vessel, 2020, 35(2): 153- 61.] [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 4.初 志辉, 陆 齐, 初 志飞, et al. 血清PDGF、Ang-2与冠状动脉粥样硬化斑块性质的关系. 心脑血管病防治. 2019;19(5):427–8, 431. doi: 10.3969/j.issn.1009-816x.2019.05.012. [初志辉, 陆齐, 初志飞, 等. 血清PDGF、Ang-2与冠状动脉粥样硬化斑块性质的关系[J]. 心脑血管病防治, 2019, 19(5): 427-8, 431.] [DOI] [Google Scholar]
  • 5.石 好宇, 赵 艺, 欧阳 雨晴, et al. 血管紧张素转换酶2在心血管疾病中的调控作用. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-SMHX202105003.htm. 生命的化学. 2021;41(5):877–85. [石好宇, 赵艺, 欧阳雨晴, 等. 血管紧张素转换酶2在心血管疾病中的调控作用[J]. 生命的化学, 2021, 41(5): 877-85.] [Google Scholar]
  • 6.Hammer A, Yang G, Friedrich J, et al. Role of the receptor Mas in macrophage-mediated inflammation in vivo. PNAS. 2016;113(49):14109–14. doi: 10.1073/pnas.1612668113. [Hammer A, Yang G, Friedrich J, et al. Role of the receptor Mas in macrophage-mediated inflammation in vivo[J]. PNAS, 2016, 113 (49): 14109-14.] [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 7.吴 丹, 陶 贵周, 贺 欣. PCSK9抑制剂: 他汀强有力的挑战者. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YXZL201711021.htm. 医学与哲学: B. 2017;38(11):54–6, 92. [吴丹, 陶贵周, 贺欣. PCSK9抑制剂: 他汀强有力的挑战者[J]. 医学与哲学: B, 2017, 38(11): 54-6, 92.] [Google Scholar]
  • 8.刘 梅林. 常用调脂药物的分类、用途及主要副作用(续3) https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZGXH201001028.htm. 中国循环杂志. 2010;25(1):69–70. [刘梅林. 常用调脂药物的分类、用途及主要副作用(续3)[J]. 中国循环杂志, 2010, 25(1): 69-70.] [Google Scholar]
  • 9.张 雅心, 江 伟豪, 陈 奕澔, et al. 从心论治方对ApoE-/-小鼠血脂和肠道菌群的影响. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZYXY202008004.htm. 中药新药与临床药理. 2020;31(8):892–9. [张雅心, 江伟豪, 陈奕澔, 等. 从心论治方对ApoE-/-小鼠血脂和肠道菌群的影响[J]. 中药新药与临床药理, 2020, 31(8): 892-9.] [Google Scholar]
  • 10.李 丽君, 唐 秋萍, 顾 毓艳, et al. 从心论治方上调PI3K/Akt磷酸化减轻HUVEC炎症损伤的体外实验研究. 中国中医急症. 2020;29(10):1719–23. doi: 10.3969/j.issn.1004-745X.2020.10.008. [李丽君, 唐秋萍, 顾毓艳, 等. 从心论治方上调PI3K/Akt磷酸化减轻HUVEC炎症损伤的体外实验研究[J]. 中国中医急症, 2020, 29(10): 1719-23.] [DOI] [Google Scholar]
  • 11.韦 永芳, 刘 寒英, 严 艳花, et al. 紫薯花色苷提取物对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用. 中国病理生理杂志. 2018;34(12):2277–82. doi: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.12.027. [韦永芳, 刘寒英, 严艳花, 等. 紫薯花色苷提取物对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用[J]. 中国病理生理杂志, 2018, 34(12): 2277-82.] [DOI] [Google Scholar]
  • 12.宋 珂, 侯 彦宏, 杨 会, et al. ApoE基因敲除小鼠疾病模型的研究进展. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YYCY201918011.htm. 中国医药导报. 2019;16(18):42–4, 48. [宋珂, 侯彦宏, 杨会, 等. ApoE基因敲除小鼠疾病模型的研究进展[J]. 中国医药导报, 2019, 16(18): 42-4, 48.] [Google Scholar]
  • 13.梁 璐, 洪 瑞云, 周 敏, et al. ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型构建. 赣南医学院学报. 2017;37(3):337–42, 364. doi: 10.3969/j.issn.1001-5779.2017.03.001. [梁璐, 洪瑞云, 周敏, 等. ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型构建[J]. 赣南医学院学报, 2017, 37(3): 337-42, 364.] [DOI] [Google Scholar]
  • 14.赵 培, 李 永辉, 高 伟, et al. 三七总皂苷通过调节TLR4/SYK信号抑制ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞的形成. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-TRCW202108001.htm. 天然产物研究与开发. 2021;33(8):1267–73. [赵培, 李永辉, 高伟, 等. 三七总皂苷通过调节TLR4/SYK信号抑制ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞的形成[J]. 天然产物研究与开发, 2021, 33(8): 1267-73.] [Google Scholar]
  • 15.刘 洋, 孙 岳, 杨 安宁, et al. 铁死亡参与高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化及ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程. 实用医学杂志. 2021;37(5):585–90. doi: 10.3969/j.issn.1006-5725.2021.05.006. [刘洋, 孙岳, 杨安宁, 等. 铁死亡参与高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化及ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程[J]. 实用医学杂志, 2021, 37(5): 585-90.] [DOI] [Google Scholar]
  • 16.梁 万洪, 黎 智文, 黄 瑞莉, et al. 心灵丸对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块及斑块内血管新生的影响. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZYXY201909012.htm. 中药新药与临床药理. 2019;30(9):1088–92. [梁万洪, 黎智文, 黄瑞莉, 等. 心灵丸对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块及斑块内血管新生的影响[J]. 中药新药与临床药理, 2019, 30(9): 1088-92.] [Google Scholar]
  • 17.胡 彦武, 杨 温欣, 包 小雪, et al. 葛根素改善动脉粥样硬化大鼠血脂异常及炎症反应的作用机制. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YYDB202102006.htm. 医药导报. 2021;40(2):175–9. [胡彦武, 杨温欣, 包小雪, 等. 葛根素改善动脉粥样硬化大鼠血脂异常及炎症反应的作用机制[J]. 医药导报, 2021, 40(2): 175-9.] [Google Scholar]
  • 18.杨 硕, 佟 倩. 黄连素在心血管疾病中的研究进展. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZLXZ201606119.htm. 中国老年学杂志. 2016;36(6):1526–7. [杨硕, 佟倩. 黄连素在心血管疾病中的研究进展[J]. 中国老年学杂志, 2016, 36(6): 1526-7.] [Google Scholar]
  • 19.左 璇, 罗 金雀, 姜 新海, et al. 小檗碱对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响及机制研究. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YXXB201901017.htm. 药学学报. 2019;54(1):104–10. [左璇, 罗金雀, 姜新海, 等. 小檗碱对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响及机制研究[J]. 药学学报, 2019, 54(1): 104-10.] [Google Scholar]
  • 20.段 媛媛, 郭 振丰, 李 雪连. 丹参酮ⅡA治疗心血管疾病研究机制新进展. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GLYZ201619024.htm. 中国临床药理学杂志. 2016;32(19):1817–20. [段媛媛, 郭振丰, 李雪连. 丹参酮ⅡA治疗心血管疾病研究机制新进展[J]. 中国临床药理学杂志, 2016, 32(19): 1817-20.] [Google Scholar]
  • 21.张 克连, 郭 静宜, 戴 若竹. 虾青素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的降脂、抗氧化和抗炎作用研究. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZMXZ202007006.htm. 中国免疫学杂志. 2020;36(7):794–8. [张克连, 郭静宜, 戴若竹. 虾青素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的降脂、抗氧化和抗炎作用研究[J]. 中国免疫学杂志, 2020, 36(7): 794-8.] [Google Scholar]
  • 22.马 伯艳, 李 寒, 李 云凤, et al. 黄连及其有效成分降糖作用的研究进展及量效关系. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZCYA201912028.htm. 中成药. 2019;41(12):2970–3. [马伯艳, 李寒, 李云凤, 等. 黄连及其有效成分降糖作用的研究进展及量效关系[J]. 中成药, 2019, 41(12): 2970-3.] [Google Scholar]
  • 23.郭 志利, 姚 克青, 姚 玉英. 小檗碱对高脂加链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的影响. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HNZK202106033.htm. 中医学报. 2021;36(6):1272–7. [郭志利, 姚克青, 姚玉英. 小檗碱对高脂加链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的影响[J]. 中医学报, 2021, 36(6): 1272-7.] [Google Scholar]
  • 24.Shao C, Ye J, Li F, et al. Early predictors of cardiovascular disease risk in nonalcoholic fatty liver disease: non-obese versus obese patients. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31724099. Dig Dis Sci. 2020;65(6):1850–60. doi: 10.1007/s10620-019-05926-7. [Shao C, Ye J, Li F, et al. Early predictors of cardiovascular disease risk in nonalcoholic fatty liver disease: non-obese versus obese patients[J]. Dig Dis Sci, 2020, 65(6): 1850-60.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 25.Liu H, Lu HY. Nonalcoholic fatty liver disease and cardiovascular disease. World J Gastroenterol. 2014;20(26):8407–15. doi: 10.3748/wjg.v20.i26.8407. [Liu H, Lu HY. Nonalcoholic fatty liver disease and cardiovascular disease[J]. World J Gastroenterol, 2014, 20(26): 8407-15.] [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 26.Dong B, Zhang C, Feng JB, et al. Overexpression of ACE2 enhances plaque stability in a rabbit model of atherosclerosis. http://citeseerx.ist.psu.edu/viewdoc/download?doi=10.1.1.605.4218&rep=rep1&type=pdf. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2008;28(7):1270–6. doi: 10.1161/ATVBAHA.108.164715. [Dong B, Zhang C, Feng JB, et al. Overexpression of ACE2 enhances plaque stability in a rabbit model of atherosclerosis[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2008, 28(7): 1270-6.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 27.Zhang C, Zhao YX, Zhang YH, et al. Angiotensin-converting enzyme 2 attenuates atherosclerotic lesions by targeting vascular cells. http://pdfs.semanticscholar.org/bfc1/d39e7a685ea24679212a3f80ba4b0893c707.pdf. PNAS. 2010;107(36):15886–91. doi: 10.1073/pnas.1001253107. [Zhang C, Zhao YX, Zhang YH, et al. Angiotensin-converting enzyme 2 attenuates atherosclerotic lesions by targeting vascular cells[J]. PNAS, 2010, 107(36): 15886-91.] [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 28.张 娜娜, 杨 志明, 边 云飞, et al. 血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导脐静脉内皮细胞表达E-选择素和单核细胞趋化蛋白1的影响. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-KDYZ200908009.htm. 中国动脉硬化杂志. 2009;17(8):651–6. [张娜娜, 杨志明, 边云飞, 等. 血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导脐静脉内皮细胞表达E-选择素和单核细胞趋化蛋白1的影响[J]. 中国动脉硬化杂志, 2009, 17(8): 651-6.] [Google Scholar]
  • 29.Burns MP, DePaola N. Flow-conditioned HUVECs support clustered leukocyte adhesion by coexpressing ICAM-1 and E-selectin. http://classic.ajpheart.physiology.org/content/288/1/H194.full.pdf. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2005;288(1):H194–204. doi: 10.1152/ajpheart.01078.2003. [Burns MP, DePaola N. Flow-conditioned HUVECs support clustered leukocyte adhesion by coexpressing ICAM-1 and E-selectin[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2005, 288(1): H194-204.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 30.苏 敏, 钟 翠平. 动脉粥样硬化病变中黏附分子ICAM-1、VCAM-1及E-selectin的表达. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-DSDX200911024.htm. 第三军医大学学报. 2009;31(11):1066–8. [苏敏, 钟翠平. 动脉粥样硬化病变中黏附分子ICAM-1、VCAM-1及E-selectin的表达[J]. 第三军医大学学报, 2009, 31(11): 1066-8.] [Google Scholar]
  • 31.Walters PE, Gaspari TA, Widdop RE. Angiotensin-(1-7) Acts as a vasodepressor agent via angiotensin Ⅱ type 2 receptors in conscious rats. Hypertension. 2005;45(5):960–6. doi: 10.1161/01.HYP.0000160325.59323.b8. [Walters PE, Gaspari TA, Widdop RE. Angiotensin-(1-7) Acts as a vasodepressor agent via angiotensin Ⅱ type 2 receptors in conscious rats[J]. Hypertension, 2005, 45(5): 960-6.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 32.Villela D, Leonhardt J, Patel N, et al. Angiotensin type 2 receptor (AT2R) and receptor Mas: a complex liaison. Clin Sci: Lond. 2015;128(4):227–34. doi: 10.1042/CS20130515. [Villela D, Leonhardt J, Patel N, et al. Angiotensin type 2 receptor (AT2R) and receptor Mas: a complex liaison[J]. Clin Sci: Lond, 2015, 128(4): 227-34.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 33.Förstermann U, Sessa WC. Nitric oxide synthases: regulation and function. Eur Heart J. 2012;33(7):593–615. doi: 10.1093/eurheartj/ehr304. [Förstermann U, Sessa WC. Nitric oxide synthases: regulation and function[J]. Eur Heart J, 2012, 33(7): 593-615.] [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 34.Sampaio WO, Souza dos Santos RA, Faria-Silva R, et al. Angiotensin-(1-7) through receptor Mas mediates endothelial nitric oxide synthase activation via Akt-dependent pathways. Hypertension. 2007;49(1):185–92. doi: 10.1161/01.HYP.0000251865.35728.2f. [Sampaio WO, Souza dos Santos RA, Faria-Silva R, et al. Angiotensin-(1-7) through receptor Mas mediates endothelial nitric oxide synthase activation via Akt-dependent pathways[J]. Hypertension, 2007, 49(1): 185-92.] [DOI] [PubMed] [Google Scholar]

Articles from Journal of Southern Medical University are provided here courtesy of Editorial Department of Journal of Southern Medical University

RESOURCES