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. 2022 Aug 20;42(8):1205–1211. [Article in Chinese] doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2022.08.13

和厚朴酚可体外减轻阿霉素诱导的心肌毒性: 基于激活AMPK/Nrf2信号通路抑制细胞焦亡

Honokiol reduces doxorubicin-induced cardiotoxicity in vitro by inhibiting pyroptosis via activating AMPK/Nrf2 signaling

Fengmei XIONG 1, Ruiping LIU 2, Yang LI 1, Na SUN 3,*
PMCID: PMC9458529  PMID: 36073220

Abstract

目的

探讨和厚朴酚（HKL）改善阿霉素（DOX）诱导的H9c2心肌细胞毒性的作用及机制。

方法

采用DOX处理H9c2细胞心肌毒性模型，随机分为4组：正常对照组、DOX处理组（DOX）、HKL和DOX共处理组（DOX+HKL）以及HKL、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂和DOX共处理组（DOX+HKL+AMPK抑制剂）。24 h后观察细胞形态变化，用CCK-8法检测细胞活力，RT-PCR检测炎性因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-1β（IL-1β）的mRNA水平，Western blot检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）、细胞色素c和细胞焦亡分子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）以及p-AMPK、红系衍生核因子相关因子2（Nrf2）的表达，免疫荧光染色观察NLRP3和p-AMPK的表达。

结果

和正常对照组相比，DOX组H9c2细胞变得肿胀且细胞活力明显降低（P < 0.05），TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著增加（P < 0.05），同时裂解的caspase-3、细胞色素c、NLRP3、Caspase-1和ASC表达增加（P < 0.05），p-AMPK和Nrf2表达降低（P < 0.05），NLRP3荧光染色强度增加，p-AMPK荧光强度降低；和DOX组相比，DOX+ HKL组细胞肿胀减轻，细胞活力明显增加（P < 0.05），TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著降低（P < 0.05），裂解的caspase-3、细胞色素c、NLRP3、Caspase-1和ASC表达降低（P < 0.05），而p-AMPK和Nrf2表达增加（P < 0.05），另外NLRP3荧光染色强度降低，p-AMPK荧光强度增加；和DOX+HKL组相比，AMPK抑制剂可以逆转HKL对DOX心肌的保护作用。

结论

HKL可通过抑制细胞焦亡减轻DOX引起的H9c2心肌细胞毒性损伤，这一作用与激活AMPK调控Nrf2信号有关。

Keywords: 和厚朴酚, 阿霉素, 心肌毒性, 细胞焦亡

阿霉素作为蒽环类药物，是临床上常用的一线广谱抗癌药，其最主要的副作用是时间和剂量依赖的心脏毒性，长期用药会导致进行性扩张型心肌病和心力衰竭[1]。以往的研究表明，阿霉素引起心脏毒性的病理机制包括DNA拓扑异构酶损伤、活性氧（ROS）诱导的线粒体损伤、氧化应激、蛋白质合成受损、胆碱能神经功能下调和心肌细胞凋亡等[2-5]。然而，这些机制并没有转化为有效的临床治疗手段，目前临床上也仅有右雷佐生用于防治阿霉素引起的心脏毒性，但它会降低阿霉素的抗癌效果[6]。因此，深入探讨阿霉素诱导心脏毒性的新机制以及新的临床防治候选药物成为研究的重点和难点。

和厚朴酚（HKL）是从木兰属植物中提取的一种生物活性物质，也是临床上广泛使用的一类传统中药[7]。研究表明HKL具有广泛的药理作用，如抑制肿瘤生长、抗心律失常、抑制心肌肥厚和抗氧化应激等[8-9]。HKL可以清除ROS保护DNA免受氧化应激损伤。同时HKL能通过抑制炎症因子的表达，消除白细胞浸润并刺激iNOS产生进而发挥抗炎作用[10]。此外，有研究表明HKL通过激活SIRT3抑制ROS生成，改善线粒体功能进而减轻阿霉素心脏毒性[11]。作为一种由炎性小体介导的细胞死亡方式，细胞焦亡在阿霉素激活Toll样受体4和NLRP3炎性小体导致的心脏毒性中发挥了重要作用[12]。同时，HKL可通过抑制NLRP3炎性小体降低炎症反应和细胞焦亡减轻急性肺损伤[13]。以往研究发现腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）/红系衍生核因子相关因子2（Nrf2）信号在LPS诱导的炎症和氧化应激损伤以及心肌缺血再灌注中发挥重要作用[14-15]。但HKL能否通过激活AMPK调控Nrf2信号抑制细胞焦亡改善阿霉素心脏毒性目前尚未见报道。本研究将采用H9c2心肌细胞，探讨HKL能否通过抑制细胞焦亡引起的炎症反应减轻阿霉素诱导的心肌毒性及其可能的作用机制。

1. 材料和方法

1.1. 细胞与试剂

H9c2心肌细胞（ScienCell）；HKL和阿霉素（Sigma）；CCK-8细胞活力检测试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒和RIPA裂解液（碧云天）；抗裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved caspase-3）、细胞色素c（Cytochrome c）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、p-AMPK、AMPK和Nrf2抗体（Cell Signaling Technology）；GAPDH（武汉三鹰生物技术有限公司）；RT-PCR试剂盒（天根生化科技有限公司）；肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和GAPDH的引物（GenScript生物科技公司）；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔和山羊抗小鼠IgG二抗（北京中杉金桥生物技术有限公司）。

1.2. H9c2心肌细胞培养和实验分组

H9c2心肌细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基在37 ℃恒温5% CO2的培养箱内培养。待细胞状态稳定后，将H9c2细胞随机分为：正常对照组（Control）：细胞正常培养24 h；阿霉素处理组（阿霉素）：用含1 μmol/L阿霉素的培养基处理细胞24 h；HKL联合阿霉素处理组（DOX+HKL）：用含5 μmol/L HKL和1 μmol/L阿霉素的培养基共同处理细胞24 h；HKL、Compound c联合阿霉素处理组（DOX+HKL+Compound c）：用含5 μmol/L HKL、10 μmol/L Compound c和1 μmol/L阿霉素的培养基共同处理细胞24 h。根据文献确定DOX、HKL和Compound c的使用浓度[16-18]。

1.3. CCK-8法检测细胞活力

H9c2细胞消化后接种于96孔板，待细胞贴壁，按照分组给予不同处理后，在每孔中加入10 μL CCK-8反应液，避光37 ℃恒温孵育2 h，检测各组吸光值A450 nm，按照说明书计算各组细胞活力。

1.4. RT-PCR检测TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平

用Trizol提取各组H9c2细胞中总的RNA，然后用DNA酶I消除DNA。用RT-PCR试剂盒将RNA反转录为cDNA。在Bio-Rad CFX96仪上检测TNF-α、IL-6、IL-1β和GAPDH的mRNA水平。引物序列如下：TNF-α正义链（5’-3’）：CTCACACTCAGATCATCTTC，反义链（5’-3’）：GAGAACCTGGGAGTAGATAAG；IL-6正义链（5’-3’）：CAGAGTCATTCAGAGCAATAC，反义链（5’-3’）：CTTTCAAGATGAGTTGGATGG；IL-1β正义链（5’-3’）：TAAGCCAACAAGTGGTATTC，反义链（5’-3’）：AGGTATAGATTCTTCCCCTTG；GAPDH正义链（5’-3’）：AGGTCGGTGTGAACGGATTTG，反义链（5’-3’）：TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA。

1.5. 免疫荧光染色检测NLRP3和p-AMPK的表达

将各组处理好的细胞先用PBS冲洗，用4%多聚甲醛固定1 h，然后用山羊血清封闭，在4 ℃下用NLRP3抗体和p-AMPK抗体孵育过夜，然后在室温下用Cy3山羊抗兔IgG孵育2 h。用PBS在摇床上洗涤3次，然后用DAPI避光37 ℃复染细胞核。在暗室中用激光共聚焦显微镜随机拍照，保存图像。

1.6. Western blot检测相关蛋白表达

采用RIPA裂解液提取细胞蛋白后，BCA试剂盒进行蛋白定量，用10% SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白样品，每孔蛋白量约30 μg，恒压湿转将蛋白转移到PVDF膜上。室温下，用含有5%脱脂奶粉的TBST缓冲液封闭2 h，将目的条带切下并放入相应的抗Cleaved caspase-3（1:1000）、抗Cytochrome c（1:1000）、抗NLRP3（1:1000）、抗Caspase-1（1:1000）、抗ASC（1: 1000）、抗p-AMPK（1:1000）、抗AMPK（1:1000）、抗Nrf2（1:1000）和抗GAPDH（1:5000）抗体中4 ℃过夜。然后用TBST洗涤3次，室温下用含辣根过氧化物酶的山羊抗小鼠或山羊抗兔二抗孵育2 h。再用TBST洗涤3次，用化学发光剂在Image Lab软件检测条带灰度值。

1.7. 统计学分析

本实验采用GraphPad Prism 8.0软件进行数据分析，数据以均数±标准差表示，采用单因素方差分析比较不同组间的差异，比较两组间的差异采用Tukey检验，P < 0.05时为差异具有统计学意义。

2. 结果

2.1. Compound c阻断HKL对阿霉素组细胞活力的作用

与Control组比较，阿霉素组细胞明显肿胀，数量减少，细胞活力显著降低（P < 0.05）；与阿霉素组比较，DOX+HKL组细胞形态改善，细胞活力增加（P < 0.05）；与DOX+HKL组比较，DOX+HKL+Compound c组细胞肿胀，细胞活力又明显降低（P < 0.05，图 1）。

图 1.

图 1

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Compound c逆转HKL对DOX组细胞活力的作用

Compound C reverses the effect of HKL against DOX-induced cell viability inhibition. A: Morphology of H9c2 cells in each group (Original magnification: ×100). B: Comparison of cell viability among the groups. *P < 0.05 vs Control group, #P < 0.05 vs DOX group, & P < 0.05 vs DOX+HKL group.

2.2. Compound c阻断HKL抑制阿霉素组细胞凋亡的作用

与Control组比较，阿霉素组Cleaved caspase-3和Cytochrome c蛋白表达明显增加（P < 0.05）；与阿霉素组比较，DOX+HKL组Cleaved caspase-3和Cytochrome c蛋白表达显著降低（P < 0.05）；而与DOX+HKL组比较，DOX+HKL+Compound c组Cleaved caspase-3和Cytochrome c蛋白表达又明显增加（P < 0.05，图 2）。

图 2.

图 2

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Compound c逆转HKL对DOX组细胞凋亡的作用

Compound C reverses the effect of HKL agaisnt DOX-induced apoptosis. a: Control. b: DOX. c: DOX+HKL. d: DOX+HKL+Compound c. *P < 0.05 vs Control group, #P < 0.05 vs DOX group, & P < 0.05 vs DOX+HKL group.

2.3. Compound c阻断HKL降低阿霉素组炎症因子mRNA表达的作用

与Control组比较，阿霉素组TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著增加（P < 0.05）；与阿霉素组比较，DOX+HKL组TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平明显降低（P < 0.05）；与DOX+HKL组比较，DOX+HKL+Compound c组TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平又显著增加（P < 0.05，图 3）。

图 3.

图 3

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Compound c逆转HKL对DOX组炎症因子的作用

Compound C reverses the effect of HKL on DOX-induced inflammatory markers. A: TNF-α mRNA level. B: IL-6 mRNA level. C. IL-1β mRNA level. *P < 0.05 vs Control group, #P < 0.05 vs DOX group, & P < 0.05 vs DOX+HKL group.

2.4. Compound c阻断HKL抑制阿霉素组细胞焦亡的作用

与Control组比较，阿霉素组NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达显著增加，同时NLRP3荧光染色强度增加（P < 0.05）；与阿霉素组比较，DOX+HKL组NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达明显减少，NLRP3荧光染色强度增加降低（P < 0.05）；与DOX+HKL组比较，DOX+HKL+Compound c组NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达显著增加，NLRP3荧光染色强度增加（P < 0.05，图 4）。

图 4.

图 4

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Compound c逆转HKL对DOX组细胞焦亡的作用

Compound C reverses the effect of HKL on DOX-induced inflammatory markers. A: Representative immunoblots of NLRP3, ASC, caspase-1 and GAPDH. a: Control. b: DOX. c: DOX+HKL. d: DOX+HKL+Compound c. B-D: Densitometric analyses of NLRP3, ASC and caspase-1. E. Representative images of NLRP3 staining (×200). *P < 0.05 vs control group, #P < 0.05 vs DOX group, & P < 0.05 vs DOX+HKL group.

2.5. Compound c阻断HKL对阿霉素组AMPK/Nrf2信号的调控作用

与Control组比较，阿霉素组p-AMPK和Nrf2蛋白表达显著降低（P < 0.05），p-AMPK的荧光染色程度降低；与阿霉素组比较，DOX+HKL组p-AMPK和Nrf2蛋白表达明显增加（P < 0.05），p-AMPK的荧光染色程度增加；与DOX+HKL组比较，DOX+HKL+Compound c组p-AMPK和Nrf2蛋白表达显著降低（P < 0.05），p-AMPK的荧光染色程度降低（图 5）。

图 5.

图 5

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Compound c逆转HKL对DOX组AMPK/Nrf2信号的作用

Compound C reverses the effect of HKL on DOX-induced AMPK/Nrf2 inhibition. A: Representative immunoblots of p-AMPK, AMPK, Nrf2 and GAPDH (a: Control. b: DOX. C: DOX+HKL. D: DOX+HKL+Compound c). B, C: Densitometric analyses of p-AMPK and Nrf2. D: Representative images of p-AMPK staining (×200). *P < 0.05 vs control group, #P < 0.05 vs DOX group, & P < 0.05 vs DOX+HKL group.

3. 讨论

由于具有广谱抗癌作用，阿霉素在临床上被广泛用于治疗各类恶性肿瘤。然而，阿霉素剂量和时间依赖性的心脏毒性会导致左心室功能障碍并最终出现心力衰竭，这在很大程度上限制了阿霉素的临床应用。阿霉素导致心脏毒性的主要原因包括：过量的ROS堆积造成脂质、DNA和蛋白的损伤，拓扑异构酶2β导致的DNA链断裂以及线粒体损伤等[19-21]。尽管大量研究报道了阿霉素导致的心脏毒性，但确切的机制仍不十分清楚。本实验通过H9c2细胞体外研究证实，HKL可激活AMPK/Nrf2信号减少细胞凋亡和细胞焦亡，抑制炎症反应，进而减轻阿霉素导致的心脏毒性。

心肌细胞作为终末分化细胞，基本丧失了分裂增殖能力[22]。阿霉素所导致的心肌细胞损伤甚至细胞死亡，引起心肌细胞数量不可逆减少、心脏病理性重塑以及心脏功能障碍，是阿霉素诱导心脏毒性的重要原因[23-25]。本研究结果发现，阿霉素处理会导致H9c2细胞肿胀死亡，同时，细胞凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Cytochrome c的表达增多；而HKL可明显改善阿霉素导致的细胞损伤，降低Cleaved caspase-3和Cytochrome c的表达，这表明HKL可以抑制阿霉素引起的细胞凋亡；然而，AMPK特异性抑制剂Compound c可逆转HKL对心肌细胞损伤和细胞凋亡的保护作用。以上这些结果说明，HKL能抑制阿霉素引起的细胞损伤和凋亡，而这一作用依赖于AMPK信号。

NLRP3炎症小体是细胞焦亡中研究较为清楚的一类胞浆大分子蛋白复合物，其炎症小体组装形成后可通过剪切Caspase-1前体，激活Caspase-1进而促进IL-1β和IL-18等炎症因子的成熟和释放，引起细胞焦亡和炎症反应[26-27]。研究表明多种心血管疾病的危险因素如糖尿病、高血压、肥胖、脂质代谢紊乱等均可以通过激活NLRP3炎症小体，参与心血管疾病的发生[28-29]。本研究发现，阿霉素处理会导致炎症反应增强，表现为TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平增加，同时，炎症小体蛋白NLRP3、Caspase-1和ASC表达升高；HKL可明显抑制阿霉素引起的TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平以及NLRP3、Caspase-1和ASC的表达，这些结果说明HKL能抑制阿霉素引起的炎症反应和细胞焦亡；而Compound c可逆转HKL对阿霉素心肌细胞TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平以及NLRP3、Caspase-1和ASC的表达，以上结果说明AMPK信号在HKL对阿霉素心肌细胞焦亡和炎症反应的作用中扮演了重要角色。

AMPK是细胞内调控能量代谢的重要信号分子，其在多种炎症或自身免疫疾病模型中发挥显著的抗炎和免疫抑制作用[30]。AMPK可通过抑制NF-κB和p38MAPK信号减轻炎症反应[14]；另外，二甲双胍能通过激活AMPK抑制Toll样受体4的表达减轻LPS引起的心肌炎症反应[31]。而Nrf2是一种关键的调控氧化还原转录因子，激活后转位至细胞核，通过抗氧化反应元件与DNA结合，上调HO-1的表达减轻氧化应激，促进细胞存活[32]。本实验结果显示，阿霉素处理会导致H9c2细胞中p-AMPK和Nrf2表达降低，而HKL能上调阿霉素中p-AMPK和Nrf2的表达，这表明HKL可以激活AMPK/Nrf2信号；更为重要的是，Compound c能阻断HKL对阿霉素中p-AMPK和Nrf2表达的上调，提示抑制AMPK可以阻断HKL对AMPK和Nrf2信号的调控。综合以上结果可以看出，HKL激活AMPK调控Nrf2信号在改善阿霉素心肌毒性中发挥至关重要的作用。

本实验证实HKL可通过抑制细胞焦亡和炎症反应减轻阿霉素引起的心肌毒性。此外，有研究发现阻断AMPK可调控Nrf2信号，而抑制Nrf2后对AMPK几乎没有影响[15]，这与本实验发现的HKL保护作用与激活AMPK调控Nrf2信号有关一致，提示AMPK是Nrf2的上游调控分子。由于本研究未对Nrf2信号进行干预，不能明确Nrf2在HKL减轻阿霉素心脏毒性中的作用。但本研究为HKL在抗肿瘤药物引起的心脏毒性中发挥保护作用提供了证据，并为HKL在临床上防治抗肿瘤药物心脏毒性提供了实验依据。

Biography

熊凤梅，硕士，主管药师，E-mail: xiongfeng10@126.com

Funding Statement

陕西省科技厅社发项目（2020SF-002）；西安市儿童医院院级课题扶持项目（2020C01）

Contributor Information

熊 凤梅 (Fengmei XIONG), Email: xiongfeng10@126.com.

孙 娜 (Na SUN), Email: lyf1982@126.com.

References

  • 1.Sawicki KT, Sala V, Prever L, et al. Preventing and Treating Anthracycline Cardiotoxicity: New Insights. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2021;61(4):309–32. doi: 10.1146/annurev-pharmtox-030620-104842. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 2.Christidi E, Brunham LR. Regulated cell death pathways in doxorubicin-induced cardiotoxicity. Cell Death Dis. 2021;12(4):339. doi: 10.1038/s41419-021-03614-x. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 3.Songbo M, Lang H, Xinyong C, et al. Oxidative stress injury in doxorubicin-induced cardiotoxicity. Toxicol Lett. 2019;307(8):41–8. doi: 10.1016/j.toxlet.2019.02.013. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 4.Catanzaro MP, Weiner A, Kaminaris A, et al. Doxorubicin-induced cardiomyocyte death is mediated by unchecked mitochondrial fission and mitophagy. FASEB J. 2019;33(10):11096–108. doi: 10.1096/fj.201802663R. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 5.胥 晓丽, 曾 菊绒, 于 晓江, et al. 多柔比星诱导的心衰大鼠心脏胆碱能神经分布及TNF-α表达的变化. 南方医科大学学报. 2012;32(8):1139–42. doi: 10.3969/j.issn.1673-4254.2012.08.14. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 6.Liu D, Ma Z, Di S, et al. AMPK/PGC1α activation by melatonin attenuates acute doxorubicin cardiotoxicity via alleviating mitochondrial oxidative damage and apoptosis. Free Radic Biol Med. 2018;129(3):59–72. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2018.08.032. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 7.Rauf A, Olatunde A, Imran M, et al. Honokiol: A review of its pharmacological potential and therapeutic insights. Phytomedicine. 2021;90(2):153647. doi: 10.1016/j.phymed.2021.153647. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 8.汤 凯淇, 张 瑜, 陈 丽竹, et al. 和厚朴酚对人舌癌CAL-27细胞增殖、迁移及凋亡的影响. 南方医科大学学报. 2020;40(4):580–5. doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2020.04.21. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 9.Pillai VB, Samant S, Sundaresan NR, et al. Honokiol blocks and reverses cardiac hypertrophy in mice by activating mitochondrial Sirt3. Nat Commun. 2015;6(2):6656. doi: 10.1038/ncomms7656. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 10.詹 萍, 熊 尚全, 柴 大军, et al. 和厚朴酚通过Wnt/β-连环蛋白通路抗动脉粥样硬化. 中华高血压杂志. 2022;30(02):153–60. [Google Scholar]
  • 11.Mihara T, Mikawa S, Kaji N, et al. Therapeutic Action of Honokiol on Postoperative Ileus via Downregulation of iNOS Gene Expression. Inflammation. 2017;40(4):1331–41. doi: 10.1007/s10753-017-0576-7. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 12.Tavakoli Dargani Z, Singla DK. Embryonic stem cell-derived exosomes inhibit doxorubicin-induced TLR4-NLRP3-mediated cell death-pyroptosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2019;317(2):H460–71. doi: 10.1152/ajpheart.00056.2019. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 13.Liu Y, Zhou J, Luo Y, et al. Honokiol alleviates LPS-induced acute lung injury by inhibiting NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis via Nrf2 activation in vitro and in vivo. Chin Med. 2021;16(1):127. doi: 10.1186/s13020-021-00541-z. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 14.Tanaka M, Kishimoto Y, Sasaki M, et al. Terminalia bellirica (Gaertn.) Roxb. extract and gallic acid attenuate LPS-induced inflammation and oxidative stress via MAPK/NF-κB and Akt/AMPK/Nrf2 pathways. Oxid Med Cell Longev. 2018:9364364. doi: 10.1155/2018/9364364. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 15.Xu C, Wang J, Fan Z, et al. Cardioprotective effects of melatonin against myocardial ischaemia/reperfusion injury: Activation of AMPK/Nrf2 pathway. J Cell Mol Med. 2021;25(13):6455–9. doi: 10.1111/jcmm.16691. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 16.Pillai VB, Kanwal A, Fang YH, et al. Honokiol, an activator of Sirtuin-3 (SIRT3) preserves mitochondria and protects the heart from doxorubicin-induced cardiomyopathy in mice. Oncotarget. 2017;8(21):34082–98. doi: 10.18632/oncotarget.16133. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 17.Zhang B, Zhai M, Li B, et al. Honokiol Ameliorates Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury in Type 1 Diabetic Rats by Reducing Oxidative Stress and Apoptosis through Activating the SIRT1-Nrf2 Signaling Pathway. Oxid Med Cell Longev. 2018:3159801. doi: 10.1155/2018/3159801. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 18.Zhang T, Zhang Y, Cui M, et al. CaMKⅡ is a RIP3 substrate mediating ischemia- and oxidative stress-induced myocardial necroptosis. Nat Med. 2016;22(2):175–82. doi: 10.1038/nm.4017. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 19.Li L, Li J, Wang Q, et al. Shenmai Injection Protects Against Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity via Maintaining Mitochondrial Homeostasis. Front Pharmacol. 2020;11:815. doi: 10.3389/fphar.2020.00815. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 20.Mizuta Y, Tokuda K, Guo J, et al. Sodium thiosulfate prevents doxorubicin-induced DNA damage and apoptosis in cardiomyocytes in mice. Life Sci. 2020;257:118074. doi: 10.1016/j.lfs.2020.118074. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 21.Hasinoff BB, Patel D, Wu X. The role of topoisomerase Ⅱβ in the mechanisms of action of the doxorubicin cardioprotective agent dexrazoxane. Cardiovasc Toxicol. 2020;20(3):312–20. doi: 10.1007/s12012-019-09554-5. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 22.Huang J, Wu R, Chen L, et al. Understanding Anthracycline Cardiotoxicity from Mitochondrial Aspect. Front Pharmacol. 2022;13:811406. doi: 10.3389/fphar.2022.811406. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 23.He L, Nguyen NB, Ardehali R, et al. Heart regeneration by endogenous stem cells and cardiomyocyte proliferation: controversy, fallacy, and progress. Circulation. 2020;142(3):275–91. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.119.045566. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 24.Ma WJ, Wei SS, Zhang BK, et al. Molecular Mechanisms of Cardiomyocyte Death in Drug-Induced Cardiotoxicity. Front Cell Dev Biol. 2020;8:434. doi: 10.3389/fcell.2020.00434. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 25.Chan BYH, Roczkowsky A, Cho WJ, et al. MMP inhibitors attenuate doxorubicin cardiotoxicity by preventing intracellular and extracellular matrix remodelling. Cardiovasc Res. 2021;117(1):188–200. doi: 10.1093/cvr/cvaa017. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 26.McLean BA, Patel VB, Zhabyeyev P, et al. PI3Kα pathway inhibition with doxorubicin treatment results in distinct biventricular atrophy and remodeling with right ventricular dysfunction. J Am Heart Assoc. 2019;8(9):e010961. doi: 10.1161/JAHA.118.010961. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 27.Huang Y, Xu W, Zhou RB. NLRP3 inflammasome activation and cell death. Cell Mol Immunol. 2021;18(9):2114–27. doi: 10.1038/s41423-021-00740-6. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 28.Jia YF, Cui RX, Wang C, et al. Metformin protects against intestinal ischemia-reperfusion injury and cell pyroptosis via TXNIP-NLRP3-GSDMD pathway. Redox Biol. 2020;32(8):101534. doi: 10.1016/j.redox.2020.101534. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 29.Toldo S, Mezzaroma E, Buckley LF, et al. Targeting the NLRP3 inflammasome in cardiovascular diseases. Pharmacol Ther. 2021;236(3):108053. doi: 10.1016/j.pharmthera.2021.108053. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 30.Dehnavi S, Kiani A, Sadeghi M, et al. Targeting AMPK by Statins: A Potential Therapeutic Approach. Drugs. 2021;81(8):923–933. doi: 10.1007/s40265-021-01510-4. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
  • 31.Vaez H, Rameshrad M, Najafi M, et al. Cardioprotective effect of metformin in lipopolysaccharide-induced Sepsis via suppression of toll-like receptor 4 (TLR4) in heart. Eur J Pharmacol. 2016;772(6):115–123. doi: 10.1016/j.ejphar.2015.12.030. [DOI] [PubMed] [Google Scholar]
  • 32.Saha S, Buttari B, Panieri E, et al. An Overview of Nrf2 Signaling Pathway and Its Role in Inflammation. Molecules. 2020;25(22):5474. doi: 10.3390/molecules25225474. [DOI] [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]

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